先天的糖タンパク質代謝異常症,β-マンノシドーシス,に関する研究

先天性糖蛋白代谢异常β-甘露糖苷沉积症的研究

• 批准号: 61580155
• 负责人: 松浦 史登
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Fukuyama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1986
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1986 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61580155/
• 关键词: 糖タンパク質代謝異常症; β-マンノシドーシス; オリゴ糖の分離

(1)オリゴ糖の微量分析法の開発:オリゴ糖の還元末端をReductive-Aminationにより紫外線吸収試薬(P-Aminobenzoic acid ethylester,ABEE)で修飾した誘導体を用いる簡便、高分離かつ高感度の中圧液体クロマトグラフ法を確立した。オリゴ糖とABEEの反応はほぼ定量的に進行し、オリゴ糖の種類にかかわらず、304nmに強い吸収を示した。分子吸光係数は還元末端の糖の種類にのみ依存しており、ヘキソースの場合2.2×【10^4】,GlcNAcの場合1.9×【10^4】であり、本法によるオリゴ糖の定量分析の可能性が認められた。ABEE化オリゴ糖は水を溶出液(22ml/h)とする、50℃でのBio Gel P-4(-400mesh)カラム(2.0×100cm)により、中性オリゴ糖1糖ずつ、グルコースオリゴマーにして約26糖迄分離され、しかもその分離は同一カラムによる未修飾オリゴ糖の分離より優れていた。HPLC用紫外線検出器を用いると数ナピコモルのオリゴ糖の分離、検出が可能であった。本法は特殊な装置を必要とせず、極めて簡便な分離分析法である。(2)蓄積オリゴ糖の臓器分布:上法を用いて、β-マンノシドーシスヤギの脳,腎臓,肝臓,甲状腺中の蓄積オリゴ糖の定性定量分析を行った。臓器により蓄積量に著しい差が認められたが、蓄積物はいずれの臓器においても、Manβ1-4GlcNAc,Manβ1-4GlcNAcβ1-4GlcNAc,Manβ1-4GlcNAcβ1-4Manβ1-4GlcNAcおよびManβ1-4GlcNAcβ1-4Manβ1-4GlcNAcβ1-4GlcNAcであった。正常および保因ヤギにはこれらのオリゴ糖は認められなかった。尿中に排出されたオリゴ糖も同様に解析し、上記4種のオリゴ糖の他に6〜8糖に相当する数種のオリゴ糖の存在を認め、現在構造解析中である。(3)糖タンパク質糖鎖の構造:正常および疾病ヤギの腎臓、尿中糖タンパク質画分の糖組成はほぼ同一であり、現在のところβ-マンノシダーゼ欠損に起因する糖鎖異常は認めていない。(4)オリゴ糖の免疫組織学的検出:現在Edestinにオリゴ糖を結合し、それを用いて免疫中である。今後この課題を中心に研究を進める予定である。

(1) Microanalysis of glycosaminoglycans has been carried out: the end of the sugar element has been modified by Reductive-Amination UV absorption spectroscopy (P-Aminobenzoic acid ethylester,ABEE). The system has been repaired with high temperature, high resolution, high sensitivity, high sensitivity, low temperature, high sensitivity, high sensitivity, high sensitivity, It is necessary to determine the amount of sugar in the ABEE, make sure that the amount of sugar is not available, and that the 304nm can be used to determine the amount of sugar. The number of molecular absorbents is dependent on the amount of sugar at the end of the molecule. The number of molecules is 2.2 × [10 ^ 4], and that of GlcNAc is 1.9 × [10 ^ 4]. This method is based on the quantitative analysis of the possibility of sugar. ABEE solution (22ml/h), 50 ℃ Bio Gel 400mesh 4 (- 400mesh), (2.0 × 100 cm), neutral sugar, sugar. HPLC uses the UV cable exporter to use the number of devices to separate the sugar from each other and to find out that it is possible to separate the sugar. In this method, it is necessary to use a special device, such as the separation analysis method. (2) Distribution of sugar accumulators: the above method was used to analyze the quality and quantity of sugar in the thyroid gland by qualitative and quantitative analysis. The Man β 1-4GlcNAc β 1-4Man β 1-4GlcNAc β 1-4GlcNAc, Man β 1-4GlcNAc β 1-4Man β 1-4GlcNAc and Man β 1-4GlcNAc β 1-4GlcNAc β 1-4Man β 1-4GlcNAc β 1-4GlcNAc β 1-4Man β 1-4GlcNAc β 1-4Man β 1-4Man β 1-4GlcNAc β 1-4GlcNAc. The normal temperature is due to the loss of sugar and sugar. The excretion of glucose in the urine is similar to the analysis of the same amount of sugar in the urine, and there are several kinds of sugar in the urine, which is now in the process of analysis. (3) Glycemic acid production: normal disease, urine glucose and urine sugar were divided into the same group of sugar, and the cause of deficiency was caused by normal disease and urine sugar. (4) Immunohistology of Edestin glucose: it is now in the process of combining glucose with glucose and immunizing with antisense drugs. In the future, the research center of the project will conduct a pre-determined study.