血色素の機能不全の分子論

血红蛋白功能障碍的分子理论

• 批准号: 62220013
• 负责人: 米山 良昌
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Special Project Research
• 财政年份: 1987
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1987 至 1988
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62220013/
• 关键词: 血色素; 異常血色素; 共鳴ラマン分光法; 紫外差スペクトル; アロステリックモデル; 鉄ヒスチジン結合; HPLC

異常血色素(ヒトHb)の中でも酸素親和性異常を示すα_1β_2鎖接触面に変異をもつ一郡のHbと原子価雑種Hbの酸素結合の分子機構の解明を目的とした研究が以下に述べる方向から行われた.I)研究材料の迅速な高性能な分離精製技術の確立 I-1)変異Hbを有する患者赤血球から高速液体クロマトグラフィー(HPLC)による迅速・高能率な異常Hb分子種の分離精製方法を確立した. これは変異が蛋白の荷電や分子会合に及ぼす影響を利用し, イオン交換カラムの溶出条件を種々工夫することによって達成され, 患者の少い血液から高能率に1時間以内に異常Hbが分離できるようになった. I-2)正常及び異常Hbの原子価雑種Hb(α^+_Xβ_2, α_2β^+_2)の作製とHPLCによる分離精製方法を確立した. この方法は従来からの単離鎖の再結合反応によるのではなく, 部分的酸化によって生成する分子種の分離によった.II)機能及び構造解析II-1)異常HbのO_2平衡曲線を測定して状態説に当てはめて解析した. その結果, 異常HbのO_2親和性の低下, 亢進の原因は, TとRの平衡のT又はR側へのずれに加わえて, T状態のO_2親和性が正常に比べ低下又は亢進するためであった.II-2)T状態のO_2親和性がどのような分子機序で調節されているかを明らかにするために異なった親和性をもつHbのデオキシ型の鉄とヒスチジン結合の特性を共鳴ラマン分光によって測定した. そしてその結合の強さがO_2親和性を規定する確度の高い結果を得た.II-3)α_1β_2接触面を介して酸素親和性を次第に高めてゆく機構があるように思われる. これを確かめるために原子価雑種Hbを作り, 鉄-ヒスチジン結合を変えた時に, この界面の構造が共同的に変化することを紫外差スペクトルによって明らかにした.

Abnormality of Hemoglobin (Hb) in the Acid Affinity Abnormal Expression α_1β_2 Lock Contact Surface Difference between Hb and Atomic Hb in the Acid Binding Molecular Mechanism of the Study of the following directions: I) Rapid development of materials for high performance separation and purification techniques I-1) Abnormality of Hb in patients with red blood cells: High speed liquid chromatography (HPLC) A method for separation and purification of high energy abnormal Hb molecular species was established. The charged molecules of different proteins meet and influence each other, and the dissolution conditions of different proteins are exchanged. The time to achieve this is less than 1 time. The abnormal Hb is separated within 1 time. The preparation and purification of Hb(α^+_Xβ_2, α_2β^+_2) from normal and abnormal Hb by HPLC were established. This method is based on the analysis of molecular species in partial acidification.II) Functional and structural analysis II-1) Determination of O_2 equilibrium curve of abnormal Hb. As a result, the affinity of Hb for O_2 is lower and the cause of its hyperactivity is higher. The affinity of T state for O_2 is lower than that of normal state and higher than that of normal state.II-2) The affinity of T state for O_2 is higher than that of normal state. II-3)α_1 β_2 contact surface, α_1 β_2 affinity, α_1β_2 affinity, α_2 affinity, α_1β_2 affinity, α_2 affinity, α_2 affinity, α_1 β_2 affinity, αThe structure of the interface is common to all kinds of metals.

项目成果

松川茂 他: J.Protein Chem.6(2). 109-119 (1987)

Shigeru Matsukawa 等人：J.Protein Chem.6(2) (1987)。

米山 良昌 編集: "蛋白質・核酸・酵素・臨時増刊 血色素の分子生理と分子病理" 共立出版K.K, 898 (1987)

米山义正编辑：“蛋白质、核酸、酶，特刊：血红蛋白的分子生理学和分子病理学”Kyoritsu Shuppan K.K，898 (1987)

馬渡一浩 他: Biochim.Biophys.Acta. 913(2). 313-320 (1987)

Kazuhiro Mawatari 等人：Biochim.Biophys.Acta 913(2) (1987)。