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DNA,RNAフラグメントのone-pot迅速合成

一锅快速合成DNA和RNA片段

基本信息

批准号：
62550671
负责人：
清水剛夫
金额：
$ 0.83万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

核酸の機能の解明は化学的測定手段によらねばならぬ面が, 今日的になりつつある現状において, 核酸フラグメントの大量合成は重要な研究課題である. 本研究は, シーケンスをもつDNAやRNAフラグメントの大量化学的合成を目的とした. そのためには, 選択的りん酸化剤を開発することによって, ヌクレオシドを保護操作を行なうことなく, 選択的にりん酸化, 選択的カップリングを行なう合成系の実現を目的とした. 本研究は, シーケンスをもつDNAフラグメントの1つの有力な大量合成法として, その中間体二量体の合成とそれによるオリゴヌクレオチド合成の可能性の検討と, シーケンスをもつRNAフラグメントの大量合成を中心として, これに, シーケンスをもつオリゴヌクレオチドの分離, また, センサーへの応用を行ったものである. (1)シーケンスを有するDNAフラグメントの合成としては, りん酸化剤として各種ジアゾリドのうちジテトラゾリド, また保護基としてはモルホリノ基がこの目的のために好適であることを明らかにし, このりん酸化剤をもって, 水酸基を保護しないヌクレオシドから, 各種二量体が均一系で高収率で得られることを明らかにした. また, この二量体は, 5´-方向, 3´-方向のいずれにもシーケンスのある鎖長延長が可能であり, さらに, 二量体のカップリングによる四量体の合成も行なわれた. 一方, (2)シーケンスをもつRNA二量体の合成には, ホスホロジクロリドがりん酸化剤として適しており, 非保護ヌクレオシドからテトラゾールを触媒として適当であることを明らかにした. 上記2つの方法は, 均一系でDNAやRNAフラグメントが容易に合成できることを示すもので, 本研究では, これに加えて, 大量のオリゴヌクレオチド(重合度〜50)分離のカラムシステムを提出し, 一方, 光重合の方法を応用した半導体コロイドへのオリゴヌクレオチドの固定と, そのコロイドによるRNAの検出法を見出した.

The function of nucleic acid is explained by chemical measurement methods, and the present situation of nucleic acid synthesis is an important research topic. In this study, DNA and RNA were synthesized in a large number of chemical compounds. The purpose of the synthesis system is to realize the protection operation of the selected acidizing agent and the selected acidizing agent. In this study, we investigated the possibility of mass synthesis of RNA by using a powerful mass synthesis method for DNA synthesis and the synthesis of intermediate dimers. (1)The synthesis of DNA molecules in the presence of acid groups, protective groups and acid groups is well suited to the purpose of DNA synthesis. The synthesis of DNA molecules in the presence of acid groups, protective groups and acid groups is well suited to the purpose. For example, the length of the lock may be extended in the 5 ′-direction, 3 ′-direction of the two-dimensional vector, and the synthesis of the four-dimensional vector may be extended in the 5 ′-direction, 3 ′-direction of the two-dimensional vector. On the one hand, (2) the synthesis of RNA biome is not suitable for the synthesis of RNA biome, and the synthesis of RNA biome is not suitable for the synthesis of RNA biome. In this study, we propose a new method for RNA isolation by photo-recombination, which is used in semiconductor technology.