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巨核芽球性白血病細胞におけるsis遺伝子発現と血小板由来増殖因子(PDGF)産生

巨核细胞白血病细胞中sis基因的表达和血小板衍生生长因子（PDGF）的产生

基本信息

批准号：
62570153
负责人：
布施晃
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62570153/
关键词：
c-sis遺伝子 PDGF 遺伝子発現 E核球培養細胞血小板

项目摘要

我々は世界で初めて血小板を放出する巨核芽球性白血病細胞の培養樹立に成功した. この細胞株を用いてc-sis遺伝子の発現とPDGFの産生を調べたので, 以下のように要約を示す.1.巨核芽球性細胞の樹立.1)巨核芽球性白血病患者の末梢血の芽球からCMK細胞株を樹立した.2)CMK細胞は患者の巨核芽球と同じ染色体変異を保持し, 巨核球の特性である多倍体の染色体を保有しているが, 4Nが主であった.3)CMK細胞は血小板関連細胞表面マーカーであるGPIIb/IIIaとGPIb抗原を保有している. 骨髄系マーカーおよび赤芽球系マーカーであるグリコフォリンAも保有している.4)電子顕微鏡的観察により, CMK細胞はα-顆粒, 血小板ペルオ, シダーゼ(PPO)を認めた.5)CMK細胞は培養液中に2〜3μmの顆粒を放出する. α顆粒を保有していること, PPO陽性であることから血小板と示唆される. 全体の構造は未熟である. 血小板の放出はTPA処理によって増加する.2.c-sis遺伝子の発現とPDGF産生1)巨核芽球性白血病患者の末梢血および骨髄中の芽球中にPDGFのB鎖をコードするc-sis遺伝子のmRNAを検出した.2)CMK細胞よりmRNAを抽出しNorthen hlot Hybridizationを行ない, 25Sc-sismRNAの存在を確認した.3)CMK細胞培養液中にPDGFが産生されていることを抗PDGF抗体による免疫沈降法で確認した. 分子量は31Kで17K前後の2量体であることがわかった.

The culture of megakaryocytic leukemia cells was successfully established in the world. 1) Establishment of megakaryoblastic cells. 1) Establishment of CMK cell lines from peripheral blood of patients with megakaryoblastic leukemia. 2) Maintenance of megakaryoblastic and polyploid chromosome diversity in CMK cells from patients with megakaryoblastic leukemia. 3)CMK cells retain GPIIb/IIIa antigens on platelet-associated cell surfaces. CMK cells were observed by electron microscopy. CMK cells were identified by α-granule, platelet, PPO. CMK cells were released from culture medium with 2 ~ 3μm granules.α-granule retention, PPO positivity, platelet activation. All structures are immature. Platelet release is enhanced by TPA treatment.2.c-sis gene expression and PDGF production. 1) PDGF B-lock mRNA expression in peripheral blood and bone marrow of patients with megakaryoblastic leukemia. 2)CMK cell mRNA expression and Northern blot Hybridization. 25. The presence of Sc-sis mRNA was confirmed. 3) PDGF production in CMK cell culture medium was confirmed by immunoprecipitation with anti-PDGF antibodies. Molecular weight 31K 17K 2.