ADA欠損リンパ球に対するデオキシアデノシンのDNA障害を介した毒性発現機序

DNA损伤介导的脱氧腺苷对ADA缺陷淋巴细胞的毒性机制

• 批准号: 63570438
• 负责人: 瀬戸 嗣郎
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Shimane Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 1989
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63570438/
• 关键词: ADA欠損症; ヒト抹消血リンパ球; 扁桃B細胞; デオキシアデノシン毒性; DNA障害; デオキシヌクレオチド・プ-ル; デオキシアデノシン; ADA欠損リンパ球; DNA修復阻害; デオキシヌクレオシド・プール

Adenosine deaminase(ADA)欠損シミュレ-ションとして、deoxycoformycineによりADAを阻害したヒト抹消血リンパ球(PBL)を用いて、deoxyadenosine(dAdo)のリンパ球障害性の研究を継続し、ADA欠損症の病態を解明しようとしてきた。前年度は、培養系へのdAdoの添加によりresting lymphocyteにおいても相当量のdATPが細胞内に蓄積され、デオキシヌクレオチド・プ-ルのバランスが崩れることにより、DNA障害がもたらされることをtime courseの検討から明らかにした。本年度の新たな知見;1.他のデオキシヌクレオチド(dN)は、いずれの1種類のdNをdAdoと同時に細胞培養系に添加しても、dAdoのDNA障害性を抑制する。2.dAdoによりもたらされたDNA strand breakは、同様に培養液中のdAdoを他のdNへ置換することによって促進的に修復される。3.dAdo毒性からのそれらdNの細胞防御作用とデオキシヌクレオチド・プ-ルの変化の関係については、deoxycytidineを除いてdATPの蓄積を阻害することによるものでなく、dATPのdegradationを促進させることによるものでもなかった。以上、抹消リンパ球のDNA修復の調節には、少なくとも2種類のデオキシヌクレオチドの細胞内バランスが関与していることが伺われた。4.ADA欠損ではin vivoにおいてもin vitroにおいてもB細胞がT細胞に比べ比較的抵抗性である。扁桃リンパ球(B細胞)とPBLの比較研究では、B細胞ではdAdo添加後のdATPの蓄積は少なく、DNA障害も軽微であった。B細胞の抵抗性を裏付けると考えられる。5.各種のDNA修復阻害剤に対するPBLの感受性の検討では、DNA polymerase阻害剤によって最も強くDNA障害がもたらされた。なかでも10μMのdAdoは同濃度のAraCよりも強いDNA障害性を示した。dAdoによるDNA障害の機序を推定しえた。

Adenosine Deaminase (ADA) owe loss シ ミ ュ レ - シ ョ ン と し て, deoxycoformycine に よ り ADA を resistance against し た ヒ ト effacement blood リ ン パ ball (PBL) を い て, deoxyadenosine (dAdo) の リ ン パ の ball handicap of sex research を 継 続 し, ADA owe loss の pathological を Explain that ようと ようと て た た た. Before the annual は, cultivate へ の dAdo の add に よ り resting lymphocyte に お い て も equivalent の dATP が intracellular accumulation of に さ れ, デ オ キ シ ヌ ク レ オ チ ド · プ - ル の バ ラ ン ス が collapse れ る こ と に よ り, DNA handicap of が も た ら さ れ る こ と を time course 検 ask for に ら Ming ら に に た. New たな insights of the year; He の デ オ キ シ ヌ ク レ オ チ ド は (dN), い ず れ の 1 species の dN を dAdo と に cell culture system at the same time add し に て も, dAdo の を inhibit DNA handicap of sex す る. 2. The dAdo に よ り も た ら さ れ た DNA strand break は, with others in に medium, の dAdo を he の dN へ replacement す る こ と に よ っ て promote に repair さ れ る. 3. The toxicity of dAdo か ら の そ れ ら dN の cells defense と デ オ キ シ ヌ ク レ オ チ ド · プ - ル の variations change の masato is に つ い て は, deoxycytidine を except い て dATP の accumulation を resistance against す る こ と に よ る も の で な く, dATP の degradation を promote さ せ る こ と に よ る も の で Youdaoplaceholder0 な った. Above, effacement リ ン パ ball の DNA repair の adjust に は, less な く と も 2 kinds の デ オ キ シ ヌ ク レ オ チ ド の intracellular バ ラ ン ス が masato and し て い る こ と が bar わ れ た. 4. ADA owe loss で は in vivo に お い て も in vitro に お い て も が T B cells に resistance than べ compare で あ る. Almond リ ン パ ball (B cells) と PBL の comparative study で は, B cell で は dAdo added after の dATP の accumulation は less な く, DNA handicap of も 軽 micro で あ っ た. B cell <s:1> resistance を pays けると test えられる. 5. の DNA repair resistance against tonic に す seaborne る PBL の susceptibility の beg で 検 は, DNA polymerase resistance against tonic に よ っ て most strong も く DNA handicap of が も た ら さ れ た. Youdaoplaceholder0 で で で を 10μM <s:1> dAdo <s:1> at the same concentration of <s:1> AraCよ strong <s:1> DNA hindricity を shows <s:1> た. dAdoによるDNA fault sequence を presumption えた.

项目成果

瀬戸嗣郎: 日本臨床免疫学会会誌. 11. 500-503 (1988)

Tsuguro Seto：日本临床免疫学会杂志 11. 500-503 (1988)。

瀬戸嗣郎: "DNA修復測定へのDNA Unwinding Assay法の応用" プリン・ピリミジン代謝. 13. 64-64 (1989)

Tsuguro Seto：“DNA 解旋测定方法在 DNA 修复测量中的应用”嘌呤和嘧啶代谢 13. 64-64 (1989)。

金井理恵: "DNA前駆物質プ-ルのアンバランスとDNA障害" プリン・ピリミジン代謝. 13. 65-65 (1989)

Rie Kanai：“DNA 前体池的不平衡和 DNA 疾病”嘌呤和嘧啶代谢 13. 65-65 (1989)。

Shiro Seto: "Toxic mechanism of deoxyadenosine via DNA damage against peripheral lymphocyte" Biochemical and Biophysical Research Communications.

Shiro Seto：“脱氧腺苷通过 DNA 损伤对外周淋巴细胞的毒性机制”生物化学和生物物理研究通讯。