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魚病細菌の宿主組織への付着機構(細菌性鰓病原因菌Flavobacterium branchiophilaの場合)

鱼病细菌对宿主组织的粘附机制（以嗜鳃黄杆菌为例，细菌性鳃病的病原体）

基本信息

批准号：
01560200
负责人：
若林久嗣
金额：
$ 1.09万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01560200/
关键词：
魚病細菌鰓病 Flavobacterium branchiophila 線毛付着

项目摘要

マス類稚魚の飼育水槽に10^4CFU/m位の濃度になるようF.branchiophilaを加え、約1時間止水(通気)とした後、流水とした。18〜24時間後に実験魚を採上げ、走査型電顕で観察すると、鰓の一面に本菌が観察された。これの切片を作製し透過型電顕で観察すると、組織内に侵入している細菌は皆無であり、すべて組織表面より数ミクロン離れた位置に並列していることがわかった。ネガティブ染色した菌体には多数の線毛が観察されたが、切片標本においても組織と菌体の間に線毛の断片と考えられる糸状物が観察された。菌体浮遊液を0.5〜1分間ブレンダ-で撹拌しても生菌数は変化しないが、これを使って上記の感染実験を行なうと、鰓には殆ど細菌が観察されなかった。これらのことから本菌が線毛によって組織に付着後、繁殖することが明らかとなった。ブレンダ-と超音波を短時間作用させて菌体から解離させた線毛をDEAE-セルロ-ス、DE52イオン交換クロマトグラフィ-などを用いて精製した。精製した線毛標品は典型的なタンパク質の紫外部吸収曲線を示し、また、ネガティブ染色を施してその形態を透過型顕微鏡で観察したところ、菌体に付着していたものと同様のフィラメント状の形態が認められた。分子量をSDSゲル電気泳動(SDS-PAGE)によって推定したところ、分子量23,000であった。また、6N HClで24時間加水分解後、835型日立高速アミノ酸分析計を用いて分析したところ既報の他菌種の線毛のアミノ酸組成に類似していた。一方、線毛標品を家兎に接種して抗血清を作製し、線毛標品および各菌株の菌体成分間のゲル内沈降反応をオクタロニ-法で観察したところ、互いに癒合した一本の沈降線が形成された。従って、精製線毛の抗原性はF.branchiophilaの各菌株に共通であると判断された。

The concentration of F. branchiphila in the rearing tank is 10^4 CFU/m. After 18 ~ 24 hours, the fish were collected, and the walking type of electricity was detected. One side of the gills was detected. This section is controlled by transmission of electricity, and bacteria are not present in the tissue surface. The majority of the cells were stained and examined. The cells were stained and examined. Cell suspension 0.5 ~ 1 min after stirring, the number of bacteria changed, and the number of bacteria changed. The bacteria are isolated from the hair and tissue, and then reproduce. The ultrasonic wave is used to decompose the bacteria, and the DEAE-S and DE52 are used to purify the bacteria. A typical UV absorption curve of a purified sample is observed by a transmission microscope. Molecular weight: 23,000 by SDS-PAGE After 24 hours of hydrolysis of 6N HCl, the acid composition of other strains reported was similar to that of Hitachi 835 High Speed Acid Analyzer. The antiserum was prepared by inoculation of a sample with a linear marker, and the sedimentation reaction between the bacterial components of the sample and the strain was detected by a method of mutual healing. The antigenicity of F.branchiophila is common to all strains of F.branchiophila.