甲状腺ペルオキシダ-ゼの甲状腺炎誘起性エピト-プの同定

甲状腺过氧化物酶诱发甲状腺炎表位的鉴定

• 批准号: 01570650
• 负责人: 小谷 富男
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: 宮崎医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01570650/
• 关键词: マウス甲状腺炎; ブタTPO; T細胞株; 甲状腺炎誘起性エピト-プ

C57BL/6マウス(B_6)にブタTPO(pTPO)を免疫することにより誘発出来る甲状腺炎の発病機構解析の目的で、B_6リンパ節細胞から樹立したpTPO特異的T-cell lineによる甲状腺炎の誘発とVaccinationおよびpTPO上の甲状腺炎誘起性エピト-プの同定を行った。T-cell lineを正常B_6に移入すると3日後に甲状腺炎が観察された。T-cell lineをattenuate後B_6に免疫し、このB_6にT-cell lineあるいはpTPOによる甲状腺炎誘発を試みると発病は有意に抑制された(in press)。エピト-プの同定はpTPO断片および合成ペプチドを抗原として、pTPO感作T-cellの増殖をみる系とこれらの抗原でB_6を免疫し甲状腺炎を誘発する系で行った。pTPOをBrCNで切断後逆相カラムにかけピ-クを含むA〜Fのフラクションに分けることが出来た。これらの分子構成をトリシンを用いたSDS-PAGEにより検討するとCとDはそれぞれ1本のbandを示したがEは2本、Fは多致のbandを示した。AとBは微小断片のためSDS-PAGEでは同定不能であった。DとEは9,600Daの共通するbandをSDS-PAGEで示し、B_6に免疫したところ甲状腺炎を誘発した。この断片のアミノ酸配列をN端から20個決め、cDNAから推測される一次構造と比較すると、75%合致する部位があった。既知のT-cellエピト-プデ-タを参考にして、各々29アミノ酸からなる隣接する2本の合成ペプチドを作製し、T-cell増殖と甲状腺炎誘発の系で検討した。片方で弱いながらもT-cell増殖が観察され病変も誘発した。このペプチドを更に各々15アミノ酸のペプチドに分割し同様の検討を行うと一方のみが有効であった。この15アミノ酸からなるペプチドが甲状腺炎誘起性エピト-プを含むと考えているが、9.600Daのフラグメントには他にもT-cellエピト-ブと思われる部位があり現在検討中である。

C57BL/6マウス (B_6) TPO (pTPO) immune system The purpose of the analysis of the mechanism of adenitis is to establish pTPO-specific T-cells using B_6 rheumatoid arthritis cells. lineによるthyroiditisのinducing発とVaccinationおよびpTPO上のthyroiditisinducing性エピト-プの同定を行った. T-cell line, normal B_6, was transplanted, and thyroiditis was diagnosed after 3 days. T-cell line を attenuate after B_6 に immune し, こ の B_6 に T-cell line あ る い は pTPO thyroiditis induces 発 を trial み る と 発 disease は intentional に suppress さ れ た (in press). T-c ellのproliferationをみる线とこれらのantigenでB_6をimmuneしthyroiditisをinducing発する线で行った. pTPOをBrCNで is cut and the reverse phase カラムにかけピ-クを contains A~F のフラクションに分けることが comes out.これらのmolecule structure をトリシンを Use いたSDS-PAGE により検 Discussion するとCとDはそれぞれ1本のbandを说したがEは2本, Fは多动のbandをshowした. A and B are tiny fragments and SDS-PAGE cannot be the same. DとEは9,600Daの公するbandをSDS-PAGEでshowし, B_6にimmuneしたところthyroiditisをinducing発した.この片のアミノAcid alignment をN-terminal から 20 determinations, cDNA から speculated される primary structure and comparison すると, 75% homogeneous する location があった. Known T-cell エピト-プデ-タを reference にして, each 々29アミノ acid からなる adjacentする2本の综合ペプチドをproduced, T-cell multiplication and thyroiditis-inducing 発の线で検検した. The film is based on a weak T-cell multiplication system and a disease-causing disease.このペプチドをChangeにeach々15アミノ sour のペプチドにdividedし同様の検ask for を行うと Party のみがeffective であった.この15アミノ acid からなるペプチドがthyroiditis induced エピト-プをcontaining むと卡えているが, 9.60 0Daのフラグメントには他にもT-cellエピト-ブと思われる PART がありNow 検検中である.

项目成果

Kotani,T.: "Experimental murine thyroiditis induced by porcine thyroid peroxidase and its transfer by the antigen-specific T cell line" Clin.Exp.Immunol.80. (1990)

Kotani,T.：“猪甲状腺过氧化物酶诱导的实验性小鼠甲状腺炎及其通过抗原特异性 T 细胞系的转移”Clin.Exp.Immunol.80。