ウサギ肝臓障害モデルにおける ^<31>PーNMRによる膜リン脂質代謝動態の研究

利用^31P-NMR研究兔肝损伤模型中的膜磷脂代谢动力学

• 批准号: 02807237
• 负责人: 森川 茂廣
• 金额: --
• 依托单位: Shiga University of Medical Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02807237/
• 关键词: ^<31>P NMRスペクトロスコピ-; 肝臓; 生体膜; リン脂質代謝; 生体NMR; 高分解能NMR; 再生肝

1.肝障害モデルの作成:肝臓におけるリン脂質代謝を検討するために、ウサギ総胆管結紮、四塩化炭素投与による肝障害モデル、ラット肝切除後の再生肝を作成し、NMRスペクトロスコピ-の対象とした。2.in vivo NMR:ウサギおよびラット肝臓用にそれぞれ ^1H、 ^<31>P二重同調の表面コイルを作成した。また、慢性の肝障害を追跡する目的で、wire lessの二重同調表面コイルを作成し、これをウサギ肝臓に埋め込んだ。それぞれ良好なin vivoの31PNMRスペクトルが得られた。これを独自に開発したソフトウェア-でphosphomoneester(PME),phosphodiester(PDE)等でピ-クに分解し、解析を行った。3. ^1H decoupling:ウサギ用の ^1H decoupling coilを作成し、decouplingを試みたが、コイル大きさや出力の問題があり、decouplingについては、現在ラット肝臓を用いて検討中である。4.in vitro NMR:肝臓組織をfreeze clampにて採取し、過塩素酸抽出液を270MHz高分解能NMR装置を用いて ^<31>Pスペクトルを測定した。ラット再生肝では、PMEのうちphosphorylethanolamine(PE)が約2倍に増加していた。5.化学分析:リン脂質代謝に関連する物質では、PMEとして、PEとphosphorylcholine(PC)が、PDEとして、glycerophosphorylethanomamine(GPE),ーcholine(GPC)が知られている。PEとGPEはHPLCを用いて、PCとGPCは酵素法を用いて定量する方法を確立していた。同時に、phosphonergeticsに関するATP、ADP、AMP、もHPLCにて定量した。6.比較検討:ラット再生肝を用いた実験では、ATP、PME(PE+PC)についてのNMRスペクトルは、定量分析結果とよく一致したが、PDEに関しては、in vivo NMRではそのピ-クは全体の20ー30%を占めるのに対し、in vitro NMR、定量分析のいずれでも5%以下に過ぎなかった。このことは、in vivo NMRを解析する上で留意すべき点である。

1. Liver injury: liver injury, liver lipid metabolism, liver cirrhosis, liver cirrhosis 2.in Vivo NMR: It's the first time we've had a double homology<31>. For the purpose of tracking down chronic liver damage, the double coherence surface of wire less is made into a single layer. 31P NMR is a good way to get rid of the virus. This is the only way to resolve problems such as phosphoroneester (PME),phosphodiester(PDE), etc. 3. ^1H decoupling: It is used to make ^1H decoupling coil. Decoupling is used to test the problem of output. Decoupling is used to test the problem of output. 4.in vitro NMR: liver tissue freeze clamp, peroxaline extract, 270MHz high resolution energy NMR device<31>PME and phosphorylethanolamine(PE) increased by about 2 times. 5. Chemical analysis: substances related to lipid metabolism, PME, PE, phosphorylcholine(PC), PDE, glycerophosphorylethanamine (GPE), choline(GPC) are known. GPE and GPC were used to establish quantitative methods. ATP, ADP, AMP and HPLC were quantified in the same time. 6. Comparative analysis: ATP, PME(PE+PC), NMR, quantitative analysis, PDE, in vivo NMR, 20 - 30% of the total, in vitro NMR, quantitative analysis, below 5%. Note that in vivo NMR analysis

项目成果

Shigehiro Morikawa: "Observation of Rat Hind Limb Skeletal Muscle during Arterial Occlusion and Reperfusion by ^<31>P MRS and ^1H MRI" Magnetic Resonance Imaging.

Shigehiro Morikawa：“通过^ 31 P MRS和^ 1H MRI观察动脉闭塞和再灌注期间的大鼠后肢骨骼肌”磁共振成像。