DNA指紋法の林木遺伝育種研究への利用のための基礎研究

DNA指纹图谱在林木遗传育种研究中的应用基础研究

• 批准号: 03660158
• 负责人: 白石 進
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03660158/
• 关键词: 林木育種; DNA指紋; 分子マ-カ-; スギ; 品種識別; 親子鑑定

遺伝育種研究を深化させる上で,優れた遺伝的指標(遺伝子マ-カ-)の開発が必要不可欠である.本研究ではDNA指紋の手法を林木を対象とした研究分野に導入し,実用化するための基礎的研究として,きわめて高い変異性を検出することができるプロ-プおよびプライマ-の開発とその評価を行った.研究対象樹種として主としてスギを用いて,まず,全DNAの単離法として現在広く用いられているCTAB法について改良を加えた.その結果,DNA回収率が著しく向上し,また,DNA純度もRFLP(制限酵素断片長多型)分析およびPCR(polymerase chain reaction)を行うのに十分であった.この確立された抽出法を用いて,九州地域の20精鋭樹クロ-ンからDNAの単離を行った.一方,DNA指紋に有効なプロ-ブとプライマ-の検索を行った.現在,DNA指紋の主流となっているRAPD法とM13法について検討した.まず,RAPD法では,合成した25組のプライマ-(10bps)対を用いてPCRによりDNAを増幅し,アガロ-ス電気泳動パタ-ン(DNA型)における変異の検出を試みたが,高い変異性を示すプライマ-対を見い出すことはできなかった.しかし,λファ-ジの1種であるM13の塩基配列の一部(約500bps)をプロ-ブとしたRFLPにおいて高い変異性が認められた.このプロ-ブを用いて,先に述べた20精鋭樹クロ-ンの識別を試みた結果,同一のDNA型を示す個体は認められず,このプロ-ブがスギのDNA指紋においてきわめて有効であることが明かとなった.これにより,今後,品種および精鋭樹クロ-ンの分類・同定,交配家系における親子鑑定,天然林での繁殖構造の解明などが可能となった.

The research on breeding should be deepened, and the instructions of the general public should not be overlooked if necessary. In this study, DNA refers to the introduction of research methods in the field of forest research, the application of the basic research, and the improvement of the performance of the research. In the study of several kinds of medical equipment, the whole DNA method has been used to improve the quality of the products. The results showed that the DNA regression rate was significantly higher than that of RFLP (restriction enzyme fragment length polymorphism) RFLP (restriction enzyme fragment length polymorphism) analysis. The effect of PCR (polymerase chain reaction) was very significant. Make sure that the extraction method is used in Kyushu area, and that the DNA is separated from the bank. On the other hand, "DNA" means that there is something wrong with you. Now, DNA means "mainstream", "RAPD", "M13" and "M13". For example, RAPD method, synthesize 25 sets of high-performance data-(10bps)-- use the frame of the PCR-based DNA, and display the data of the DNA-based electrophoretic (DNA-based) filter. The high-performance performance indicates that the data is not valid. One (about 500bps) training program (about 500bps) is based on the distribution of one type of information, λ, λ, and M13. This is the most important part of the information system. Please tell me the results of the 20-minute computer-to-user test. The same DNA type shows that you have a bad DNA, which means that you need to know how to do it. In the future, the classification of mating families is the same, and the identification of mating families shows that it is possible to breed in natural forests.