水稲老化葉からの窒素転流に関与するアンモニア同化系酵素群の分子生物学的研究

参与老化稻叶氮转运的氨同化酶的分子生物学研究

• 批准号: 03640563
• 负责人: 山谷 知行
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03640563/
• 关键词: 水稲老化葉; 窒素転流; アンモニア同化酵素; グルタミン合成酵素; グルタミン酸合成酵素; 遺伝子発現; 分子生物学

本研究では、イネ老化葉における細胞質型グルタミン合成酵素(GS1)と窒素転流先でのNADH依存性グルタミン酸合成酵素(GOGAT)に着目し、イネの窒素転流におけるこれらの役割を、分子生物学的手法を用いて解明することを目的とし、以下の成果を得た。1.イネ老化葉におけるGS1ー1)イネ着生葉の老化に伴うGS1ポリペプチドの単葉内分布変化を、葉緑体GS(GS2)・FdーGOGAT・Rubisco・グルタミン酸脱水素酵素(NADHーGDH)ポリペプチドの分布と、それぞれ特異抗体を用いた免疫学的手法で比較した。その結果、GS1ポリペプチドは葉身の中央部に多く、その含量は老化後期でも大きな変化を示さず、先端部に多く存在し、老化に伴って著減する他の酵素タンパク質とは異なっていた。また、GS1mRNAは、葉身各部位において、老化に伴い微増していることが明かとなった。2)Tissue Print Immunoblot法によるGS1・GS2タンパク質のイネ葉組織内分布を検討した結果、GS1は維管束系に局在しており、葉肉細胞に局在していたGS2・FdーGOGAT・NADHーGOGATとは全く異なっていた。以上の結果は、GS1が老化葉でのGluからGluへの変換を担っていることを強く示唆しており、その成果をPlant Physiol.に投稿した。2.生長中の組織におけるNADHーGOGATー1)窒素の転流先において、GluからGluへの変換を担う可能性のあるNADHーGOGATを、世界に先駆けて生成し、その特異抗体を得た。2)この抗体を用いて、NADHーGOGATポリペプチド含量及びその活性が、イネ葉身の葉鞘に包まれた未展開葉身及び3)穂において、高いことが明かとなった。以上の結果は上記の可能性を強く示唆し、その成果を1)はPlant Physiol.に投稿し、現在印刷中である。また、2)と3)については現在投稿準備中である。

In this study, cell-based synthetic enzymes (GS1), asphyxiating enzymes (GOGAT), NADH-dependent enzymes, asphyxiating enzymes (GOGAT), molecular biology techniques, molecular biology techniques and molecular biology techniques were used in this study. 1. "Aging", "GS1" 1), "aging" with "GS1", "Rubisco", "internal distribution", "GS (GS2) FdGAT ·Rubisco", "acid dehydrase", "acid dehydrase", "specific antibody", "immunological method". The results showed that the central part of the body was more abundant, the content of GS1 was higher than that in the post-aging stage, and that there was a lot of evidence at the end, and that the aging was accompanied by the presence of other enzymes. The baby, GS1mRNA, all parts of the body, aging is accompanied by microcosm, and the skin is clear. 2) the results of the Tissue Print Immunoblot method for the distribution of GS1 ·GS2 in the GOGAT group, the results of the GS1 maintenance and maintenance of the system, and the distribution of the whole body in the GS2 ·Fddle GOGAT. The above results, GS1 aging, Glu, Glu, Plant Physiol, etc. "submit a contribution". two。 In the growing tissue, asphyxiating hormone (NADH), asphyxiant (GOGAT), Glu (Glu), NADH (GOGAT), world precursors, and specific antibodies were detected. 2) Antibody test, NADHGAT antibody content and activity test, body test, scabbard test, undeveloped body and 3) antibody test. As a result of the above results, the possibility of abetting and instigation is strongly indicated and the results are 1) Plant Physiol. "contribution", which is now in printing. /

项目成果

Kazunari Kamachi: "Vascular bundleーspecific localization of cytosolic glutamine synthetase in rice leaves." Plant Physiology.

Kazunari Kamachi：“水稻叶片中胞质谷氨酰胺合成酶的维管束特异性定位。”

Kazunari Kamachi: "Changes in cytosolic glutamine synthetase polypeptide and its mRNA in a leaf blade of rice plant during natural senescence." Plant Physiology. 98. (1992)

Kazunari Kamachi：“自然衰老过程中水稻叶片中胞质谷氨酰胺合成酶多肽及其 mRNA 的变化。”

Toshihiko Hayakawa: "Puritication,characterization,and immunological properties of NADHーdependent glutamate synthase from rice cell cultures." Plant Physiology. 98. (1992)

Toshihiko Hayakawa：“水稻细胞培养物中 NADH 依赖性谷氨酸合酶的纯化、表征和免疫学特性。”植物生理学 98。（1992）