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ショウジョウバエのフェノ-ルオキシダ-ゼの活性化機構

果蝇酚氧化酶的激活机制

基本信息

批准号：
03640618
负责人：
大西英爾
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Okayama University of Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ショウジョウバエの野生型OregonRを大量に飼育し,その蛹からプロフェノ-ルオキシダ-ゼ2種を抽出精製することに成功した。方法は,硫安分画,セファクリルS200によるゲルクロマトグラフィ-,DEAEーセルロ-スと,ヒドロキシルアパタイトによるカラムクロマトグラフィ-であった。これらの方法により,A_1とA_3と名付けられた分子種が得られ,SDSーPAGEにより,そのモノマ-の分子量はいずれも約8万であり,またス-パ-デックス200によるゲルクロマトグラフィ-の溶出位置から,未変性の分子量は両者とも約15万であった。このプロフェノ-ルオキシダ-ゼは,同じ蛹の抽出液から,異なる硫安分画で得られた活性化酵素を含む分画により速やかに活性化を受けて活性型のフェノ-ルオヤシダ-ゼとなった。A_1は,Lード-パとともにLーチロシンも酸化する酵素を生ずるが,A_3からはLーチロシンの酸化能のない酵素、すなわちジフェノ-ルオキシダ-ゼが得られた。活性化酵素については現在精製中であるが,低濃度のρーamidino phengl melhanesulfonic fluorideなどのセリンプロテマ-ゼの特異的阻害剤や,ρーnitrophenyeーguanidinobenzoateなどのトリプシン型プロテア-ゼの阻害剤で活性が抑制されることから,セリンプロテア-ゼの一種であると思われる。また,一般に,動植物界にセリンプロテア-ゼのインヒビタ-が広く分布しており,特定のセリンプロテア-ゼの活性調節に関与していると考えられているので,ショウジョウバエの蛹から,プロフェノ-ルオキシダ-ゼの活性化酵素の特異的阻害を行なうインヒビタ-の抽出を試みたところ,分子量の余り大きくない分画に活性を阻害するインヒビタ-が存在することが明らかとなった。現在この物質の精製を進めている。

The wild-type OregonR was reared in large numbers, and the pupa was reared in large numbers. The method, thioampere, S200, DEAE, S200, Thioampere, thioampere, thioampere and thioampere. The method is effective, and the molecular weight of the molecular species is less than 80, 000, the molecular weight of the unmodified molecular weight is about 150000, the molecular weight of the molecular weight is about 80, 000, the molecular weight of the molecular weight, the molecular weight, the molecular weight, In the same way as the pupa extract, the active enzyme contains the active enzyme, the speed, the activity, the activity and the activity. In the first place, the enzyme was acidified. The enzyme was acidified. The enzyme was acidified. Activating enzymes are now present in the seminal fluid with high activity, low activity, low concentration, low temperature, low temperature, In the world of animals and plants, in the world of animals and plants, they are distributed in the world of animals and plants, in the world of animals and plants. The molecular weight is very high, and the molecular weight is very high. At present, the goods and materials are in full swing.