還元的TCAサイクルの鍵反応に関与する酸化還元因子

参与还原 TCA 循环关键反应的氧化还原因子

• 批准号: 05760060
• 负责人: 石井 正治
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05760060/
• 关键词: フェレドキシン; 還元的TCAサイクル

好熱・絶対独立栄養性水素細菌 Hydrogenobacter thermophilus の無細胞抽出液からフェレドキシンを単離し、同菌の炭酸固定経路(還元的TCAサイクル)に同物質が関与しているか否かを明らかにすることを目的とした。本研究過程で以下の点が明らかにされた。1 フェレドキシンのアッセイ法の改良当初は同菌由来のヒドロゲナーゼを用いることで実験系を組んでいたが、同酵素はフェレドキシンとの反応効率が低いことが示されたため、alpha-ケトグルタレートオキシドレダクターゼ反応を利用し、メトロニダゾール還元活性の回復という方法でアッセイを行うこととした。2 フェレドキシンの単離上記アッセイ法を用いて無細胞抽出液を各種カラムクロマトに供した所、好気的条件下ではフェレドキシンの失活が激しいことが示された。そこで、嫌気的にカラムクロマトを行った。無細胞抽出液を Q-Sepharose,DEAE5PW,Gel filtrationの各カラムクロマトに供し、クロマト的に単一な標品を得た。3 フェレドキシンの性質精製フェレドキシンは、精製alpha-ケトグルタレートオキシドレダクターゼと反応することが示され、還元的TCAサイクルへの還元力供給物質がフェレドキシンであることが示唆された。

Hydrogenobacter thermophilus The cell-free aspirate of からフェレドキシンを単し, the carbonic acid-fixed 経路 of the same bacteria (restored TC Aサイクル) is the same thing as the substance and the purpose is the same. The process of this research is as follows. 1フェレドキシンのアッセイ法の Improvement of the same bacteria origin のヒドロゲナーゼを用いるこThe とで実験system をgroup んでいたが, the same enzyme はフェレドキシンとのreaction efficiency is low いことがShow the use of されたため、alpha-ケトグルタレートオキシドレダクターゼanti-reflectionし、メトロニダゾール restore active のrepair という method でアッセイを行 うこととした. 2 Various カラムクロマ used in the フェレドキシンの単アッセイ method. The トにprovides the した place, and the ではフェレドキシンのactivation がexcited しいことがshows the された under the good conditions.そこで、にカラムクロマトを行った who dislikes it. Cell-free extraction fluids such as Q-Sepharose, DEAE5PW, and Gel filtration are available from each of the standard products of Kalimanto and Kalimanto. 3フェレドキシンの properties refined フェレドキシンは, refined alpha-ケトグルタレートオキシドレダクターゼとanti応することがshows され, and the restored TCA サイクルへのrestores the power to supply matter がフェレドキシンであることが时攆された.