還元的TCAサイクルの鍵反応に関与する酸化還元因子

参与还原 TCA 循环关键反应的氧化还原因子

• 批准号: 05760060
• 负责人: 石井 正治
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05760060/
• 关键词: フェレドキシン; 還元的TCAサイクル

好熱・絶対独立栄養性水素細菌 Hydrogenobacter thermophilus の無細胞抽出液からフェレドキシンを単離し、同菌の炭酸固定経路(還元的TCAサイクル)に同物質が関与しているか否かを明らかにすることを目的とした。本研究過程で以下の点が明らかにされた。1 フェレドキシンのアッセイ法の改良当初は同菌由来のヒドロゲナーゼを用いることで実験系を組んでいたが、同酵素はフェレドキシンとの反応効率が低いことが示されたため、alpha-ケトグルタレートオキシドレダクターゼ反応を利用し、メトロニダゾール還元活性の回復という方法でアッセイを行うこととした。2 フェレドキシンの単離上記アッセイ法を用いて無細胞抽出液を各種カラムクロマトに供した所、好気的条件下ではフェレドキシンの失活が激しいことが示された。そこで、嫌気的にカラムクロマトを行った。無細胞抽出液を Q-Sepharose,DEAE5PW,Gel filtrationの各カラムクロマトに供し、クロマト的に単一な標品を得た。3 フェレドキシンの性質精製フェレドキシンは、精製alpha-ケトグルタレートオキシドレダクターゼと反応することが示され、還元的TCAサイクルへの還元力供給物質がフェレドキシンであることが示唆された。

The cell-free extract of Hydrogenobacterium thermophilus is isolated from the cell-free extract of Hydrogenobacterium thermophilus, and the carbon acid fixation circuit of the same bacteria (TCA solution of the original) is related to the same substance. The following points were made in the course of this study. 1. The improvement of the method of reducing the activity of the original bacteria, the origin of the bacteria, the use of the enzyme, the combination of the enzyme, the enzyme, the reaction efficiency of the enzyme, the use of the enzyme, the method of reducing the activity of the enzyme, the method of reducing the activity of the enzyme. 2. The inactivation of cell extracts under various conditions without cell extracts was studied.そこで、嫌気的にカラムクロマトを行った。Cell free extract: Q-Sepharose,DEAE5PW,Gel filtration, etc. 3. The properties of TCA are refined, alpha refined and reduced.