単一心筋細胞を用いたgap junctionチャネルの制御機構の解明

使用单个心肌细胞阐明间隙连接通道的调节机制

• 批准号: 05770032
• 负责人: 鶴原 由一
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: 佐賀医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770032/
• 关键词: ギャップジャンクション; パッチクランプ; 単一心室筋細胞

モルモットの単一心室筋細胞において、細胞外カルシウム(Ca)濃度をきわめて低く(<10nM)保てば、膜に残存しているgap junction hemichannelが開口するのではないかとの仮説を検証するために、パッチクランプ法を用いて電気生理学的検討を行った。すなわち、既知の膜電流を抑制するような条件下で、全細胞記録により全細胞膜コンダクタンス(Gm)を測定し、その性質を二連細胞でこれまでに報告されているgap junctionチヤネル電流と比較した。1.Gmには時間依存性を認めた。2.Gmはgap junctionチヤネルのuncouplerであるoctanolにより抑制された。3.Gmの細胞外Ca濃度依存性は細胞外pHに大きく影響を受け、二連細胞のgap junctionチヤネル電流よりもCa感受性は低かった。Gmの細胞外pH依存性は報告されているgap junctionチヤネル電流のものとほとんど同様であった。4.細胞内灌流法を用いてGmの細胞内Ca濃度依存性を調べると、細胞内Ca濃度上昇によりGmは10から30%減少した。すなわち、Gmのうち大部分はgap junctionチヤネルとは性質が異なる未知のコンダクタンスであることがわかった。細胞外カルシウム(Ca)濃度をきわめて低く保つことで、細胞外Ca濃度依存性の未知のコンダクタンスを認めたが、そのすべてがgap junction hemichannelに関係したコンダクタンスであるとは考えれなかった。

The study was conducted using electrophysiological methods to investigate the effects of low (<10nM) extracellular Ca concentration and membrane residual Ca concentration in isolated ventricular muscle cells. The gap junction current was measured by whole-cell recording under conditions known to inhibit membrane currents and compared with the gap junction current in two connected cells. 1. Gm is time-dependent. 2. Gm gap junction workers and uncoupler octanol are suppressed. 3. The dependence of extracellular Ca concentration on Gm was influenced by extracellular pH, and the gap junction current of Gm was influenced by Ca sensitivity. The extracellular pH dependence of Gm is also reported in the gap junction current. 4. Intracellular Ca concentration dependence of Gm was modulated by intracellular perfusion method, and Gm decreased by 30% due to increase of intracellular Ca concentration. Most of them are gap junctions, and their properties are different. Extracellular Ca concentration is low, and the dependence of extracellular Ca concentration on gap junction hemechannel is unknown.