炎症性腸疾患に於けるマイコバクテリウム感染の分子生物学的検討

炎症性肠病分枝杆菌感染的分子生物学研究

• 批准号: 05770355
• 负责人: 横山 雄一
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kochi Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770355/
• 关键词: 炎症性腸疾患; マイコバクテリウム

炎症性腸疾患患者の中でもクローン病に於いてしばしば、マイコバクテリウムがその腸組織の長期培養から同定されたり、或いはマイコバクテリウムに対する患者血清中の抗体価よりクローン病に於けるマイコバクテリウムの関与に関しては賛否両論存在している。今回クローン病患者7人、潰瘍性大腸炎患者9人、コントロール11人から得られた大腸組織からDNAを抽出しマイコバクテリウムに特異的プライマーを用いてpolymerase chain reaction(PCR)を行った。PCRはdenature;94°C for 30 sec,annealing;55°C for 2 min,extension;72°C for 90 secの条件で33サイクル行った。<結果> マイコバクテリウムを広く検出するプライマー(5´-GAGATCGAGCTGGAGGATCCGTA-3´,5´-GCGGATCTTGTTGACGACCAGGG-3´)をABI社製DNA合成機を使って合成し、これを用いてPCRを行い、できたサンプルをアガロース・ゲル電気泳動にかけサザン・ブロット解析を行った。その結果クローン病患者行7人中7人、潰瘍性大腸炎患者9人中8人、コントロール11人中10人に陽性であった。今回の実験ではマイコバクテリウムの中のどの菌種であるのかは特定できないが大多数の日本人の大腸には何らかのマイコバクテリウムが存在していることが判明した。又現在牛にクローン病と類似した病気をつくることで知られているMycobac-terium paratuberculosisに特異的とされるプライマー(5´-GTTCGGGGCCGTCGCTTAGG-3´,5´-GAGGTCGATCGCCCACGTGA-3´)を用いたPCRを、さらに母数を増やして検討しているところである。少なくとも、現時点でクローン病患者4人がM.paratuberculosis陽性であった。

In patients with inflammatory bowel disease の で も ク ロ ー に ン disease in い て し ば し ば, マ イ コ バ ク テ リ ウ ム が そ の intestinal tissue の long-term training か ら with fixed さ れ た り or い は マ イ コ バ ク テ リ ウ ム に す seaborne る の antibody in serum 価 よ り ク ロ ー に ン disease in け る マ イ コ バ ク テ リ ウ ム の masato and に masato し て は 賛 ever struck existing し て い る. Today back ク ロ ー ン patients, 7, 9 patients with ulcerative colitis, コ ン ト ロ ー ル 11 か ら have ら れ た e. organization か ら を DNA extraction し マ イ コ バ ク テ リ ウ ム に specific プ ラ イ マ ー を with い て polymerase chain reaction (PCR) line を っ た. PCR youdaoplaceholder7 denature; 94°C for 30 sec,annealing; 55°C for 2 min,extension; 72°C for 90 seconds <s:1> condition で33サ サ サ サ った った lines った. "Result マ イ コ バ ク テ リ ウ ム を hiroo く 検 out す る プ ラ イ マ ー (5 ´ - GAGATCGAGCTGGAGGATCCGTA - 3 ´ ´ - GCGGATCTTGTTGACGACCAGGG - 3 ´) を ABI club system of DNA synthesis machine を make っ て synthetic し, こ れ を with い て PCR を い, で き た サ ン プ ル を ア ガ ロ ー ス · ゲ ル electric 気 swimming に か け サ ザ ン · ブ ロ ッ ト parsing line を っ た. そ の results ク ロ ー ン patients line 7 out of 7 and 8 of 9 patients with ulcerative colitis, コ ン ト ロ ー ル 10 out of 11 に positive で あ っ た. Today back to の be 験 で は マ イ コ バ ク テ リ ウ ム の in の ど の strains で あ る の か は specific で き な い が most の Japanese の e. に は what ら か の マ イ コ バ ク テ リ ウ ム が exist し て い る こ と が.at し た. And now cattle に ク ロ ー ン disease と similar し た disease 気 を つ く る こ と で know ら れ て い る Mycobac - terium Paratuberculosis に specific と さ れ る プ ラ イ マ ー (5 ´ - GTTCGGGGCCGTCGCTTAGG - 3 ´ ´ - GAGGTCGATCGCCCACGTGA - 3 ´) を with い た PCR を, さ ら に parameter を raised や し て beg し 検 て い る と こ ろ で あ る. There are 4 patients with が m. paratuberculosis positive であった.

项目成果

Y YOKOYAMA: "Mycobacteria in the human intestine" GUT. in press.

Y YOKOYAMA：“人类肠道中的分枝杆菌”GUT。