肺構成細胞における腫瘍壊死因子(TNF)受容体の遺伝子発現と可溶性TNF受容体生産機構に関する研究

肺构成细胞肿瘤坏死因子（TNF）受体基因表达及可溶性TNF受体产生机制研究

• 批准号: 05770391
• 负责人: 中村 秀範
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770391/
• 关键词: 腫瘍壊死因子I型受容体; 可溶性腫瘍壊死因子受容体; 遺伝子発現; A549細胞; ノーザンハイブリダイゼーション

はじめに外科的に摘出された健常肺組織および肺癌組織からRNAを抽出し、腫瘍壊死因子受容体(Tumor Necrosis Factor Receptor, TNFR)の遺伝子発現レベルをノーザンハイブリダイゼーション法にて検討した。健常肺組織は、I型およびII型TNFR遺伝子の両者を発現していたが、肺癌組織では、I型のTNFR遺伝子の発現が優位であった。次に培養肺上皮細胞由来株(A594)について検討してみると、A549細胞はI型TNFR遺伝子のみを発現していた。そこで肺上皮細胞のモデルとして、A594細胞を用いI型TNFR遺伝子発現のレベルを修飾する因子について検討した。phorbol myristate acetate(PMA,80 nM)刺激ではI型TNFR遺伝子発現レベルは時間依存性に増加したが、腫瘍壊死因子(TNF,1mug/ml)で刺激すると、I型TNFR遺伝子の発現は逆に時間依存性に低下した。過酸化水素(H_2O_2,100nM)の刺激は遺伝子発現レベルに影響を及ぼさなかった。^<129>I-TNF binding assayを用い、細胞表面のTNFRの発現レベルを検討すると、PMAの刺激24時間後では増加、TNFの刺激では減少しており、これは遺伝子発現の調節レベルの結果と一致していた。H_2O_2刺激では、^<129>I-TNFの結合能に変化はなかった。A549細胞の培養上清中に、無刺激の場合でも可溶性TNFRが検出されたが、PMA,TNFおよびH_2O_2の刺激後すべてにおいて可溶性受容体は増加していた。I型TNFRの発現は、遺伝子発現レベルにおいても調節されうること、可溶性TNFRの遊離は遺伝子発現の調節と異なる幾序を介して行われていることが示された。

RNA extraction from healthy lung tissues and lung cancer tissues, Tumor necrosis factor receptor (TNFR) gene expression and gene expression were investigated by using a new method. The expression of TNFR gene in normal lung tissues was higher than that in lung cancer tissues. In addition, A594 cells were cultured and A549 cells were cultured. The expression and modification of TNFR gene in lung epithelial cells and A594 cells were studied. Stimulation with phorbol myristate acetate(PMA,80 nM) increased the time-dependent expression of type I TNFR gene, whereas stimulation with tumor necrosis factor (TNF,1 ug/ml) decreased the time-dependent expression of type I TNFR gene. Effects of peracidified water (H_2O_2, 100nM) on the development of the gene. <129>I-TNF binding assay was used, TNFR expression on cell surface was discussed, PMA stimulation increased after 24 hours, TNF stimulation decreased, and regulation of TNFR expression was consistent. H_2O_2 stimulated the binding of TNF and H_2O_2<129>. In the culture supernatant of A549 cells, soluble TNFR expression increased in the absence of PMA, TNF and H_2O_2. Type I TNFR expression, gene expression and regulation, soluble TNFR free gene expression and regulation of different sequences

项目成果

中村 秀範: "好中球エラスターゼinhibitor吸入療法による肺傷害の治療とその意義" 侵襲と免疫. 8. 27-30 (1993)

Hidenori Nakamura：“中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂吸入疗法治疗肺损伤及其意义”《侵袭与免疫学》，8. 27-30 (1993)。

H.Nakamura: "Modulation of tumor necrosis factor receptor gene expression and shedding soluble tumor necrosis factor receptors by inflammatory mediators" American Review of Respiratory Disease. (in press). (1994)

H.Nakamura：“炎症介质调节肿瘤坏死因子受体基因表达和释放可溶性肿瘤坏死因子受体”美国呼吸疾病评论。

中村 秀範: "肺胞上皮細胞株(A549)における腫瘍壊死因子I型受容体の遺伝子発現と可溶性腫瘍壊死因子受容体の遊離調節" 日本胸部疾患学会雑誌. (in press). (1994)

Hidenori Nakamura：“肺泡上皮细胞系（A549）中肿瘤坏死因子 I 型受体的基因表达和可溶性肿瘤坏死因子受体释放的调节”日本胸部疾病学会杂志（1994 年）。

H.Nakamura: "Tumor necrosis factor modulation of the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator gene" FEBS letters. 314. 366-370 (1992)

H.Nakamura：“囊性纤维化跨膜电导调节基因的肿瘤坏死因子调节”FEBS 字母。