肺deltaグルタミルトランスペプチダーゼの生後誘導における酵素刺激の役割に関する研究

酶刺激在出生后诱导肺δ谷氨酰转肽酶中的作用研究

• 批准号: 05770414
• 负责人: 高橋 勇二
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: National Institute for Environmental Studies
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770414/
• 关键词: グルタミルトランスペプチダーゼ; 発達; 酸素; 肺; ラット; RT-PCR

胎児の肺は子宮内の低酸素環境下にあるが、新生児の肺上皮は呼吸の開始によって酸素分圧の急上昇にさらされる。このような酸化ストレスの急上昇に対する適応機構を明らかにするため、抗酸化剤であるグルタチオンの細胞内濃度を制御しているGGT(gamma-glutamyl transpeptidase)の発現を、In vivoおよびIn vitroの実験系を用いて検討した。1)、妊娠18日齢から生後8週齢のラットの肺におけるGGT遺伝子の発現をノーザンブロッテイング方を用いて検討した。GGT遺伝子の発現は、妊娠18日齢から認められ生後4週齢には最大値に達し、GGT酵素活性の誘導パターンとほぼ一致した。RNAの分子量は発達にともなって2.1Kbから2.4Kbにシフトし、胎仔期と生後発達期では異なった遺伝子が発現している可能性が示唆された。2)、これまで報告されている3種類のGGT遺伝子の特異的配列をプライマーとしたRT-PCR法を用いて、各発達期に発現しているGGT遺伝子の分子種を検討した。その結果、胎仔期には腎臓型の分子量2.1KbのmRNAが、生後発達期には肝臓型の分子量2.4KbのmRNAが発現することが明らかになった。3)、腎臓型から肝臓型への遺伝子発現の切り替えの機構を探るため、妊娠18日齢のラット胎仔の肺から上皮細胞を分離精製し、3%および21%の酸素濃度環境下に培養した。3%酸素濃度下では腎臓型のGGTmRNAが、21%酸素濃度下では肝臓型のmRNAが検出された。4)、以上の結果から、肺のGGT遺伝子は発達段階に対応した発現制御を受けており、酸素刺激に関連した因子が遺伝子発現の制御に関わっていることが強く示唆された。

The fetal lung is exposed to low levels of acid in the uterus, and the neonatal lung epithelium is exposed to rapid increases in acid pressure during the onset of respiration. The development of GGT(gamma-glutamyl transferase), In vivo and In vitro, is discussed in the context of the regulation of intracellular concentrations of anti-acidifying agents in response to rapid increases in the acidity of GGT. 1)The development of GGT gene at 8 weeks after birth on the 18th day of pregnancy was studied by using the method of early pregnancy. GGT gene expression was observed at the 18th day of pregnancy and reached its maximum at the 4th week after birth. GGT enzyme activity was induced at the same time. The molecular weight of RNA was increased from 2.1 Kb to 2.4 Kb, and the possibility of different DNA fragments appearing during fetal and postnatal development was also discussed. 2)In this report, we used RT-PCR to analyze the specific alignments of the three types of GGT genes, and the molecular species of the GGT gene were detected at each development stage. The results showed that mRNA of 2.1Kb for kidney type was detected in fetal period, and mRNA of 2.4Kb for liver type was detected in postnatal period. 3)The lung epithelial cells of the fetus on the 18th day of pregnancy were isolated and purified, and cultured in an acid concentration of 3% to 21%. GGT mRNA was detected at 3% and 21% concentrations respectively. 4)The above results show that GGT gene expression reaches the stage of development, and the expression of GGT gene expression is controlled by acid stimulation.