タム糖蛋白の排泄動態からみた胎児期新生児期の腎機能の発達に関する研究

从Tamm糖蛋白排泄动力学角度研究胎儿及新生儿期肾功能发育

• 批准号: 05770516
• 负责人: 今村 博明
• 金额: $ 0.45万
• 依托单位: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770516/
• 关键词: タム糖蛋白; 新生児腎機能

新生児尿中タム糖蛋白(Tamm-Horsfall glycoprotein:以下THP)排泄量の測定をenzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)法にて行った。固相化抗体としてCerdarlane社の抗THPモノクローナル抗体を使用し、二次抗体(標識抗体)はBinding Site社のペルオキシダーゼ標識ヒツジ抗ヒトTHPポリクローナル抗体(当初はアルカリフォスファターゼ標識抗体で測定したが感度が悪いため変更した。)を使用した。基質溶液はKirkegaard&Perry Laboratories社のTMB Microwell Peroxidase Substrate Systemを使用し、標準曲線にはBiomedical Technologies社のHuman Tamm-Horsfall glycoproteinを使用し作成した。固相化抗体は1000倍に希釈し、4℃で一夜反応させた後、洗浄し検体及び標準液を加え再び4℃で一夜反応させる。標識抗体は50,000倍に希釈して、2時間反応させ洗浄し、基質発色液を加え20分反応させ、比色計にて吸光度450nmで測定した。測定感度は10ng/mlから1000ng/mlであった。上記測定法により得られた正常新生児尿中THP濃度は、日齢1では平均18.8mg/L、日齢3では10.2mg/L、日齢7では7.1mg/Lであった。また、腎エコー検査より得られた腎体積と尿中THP排泄量の関係を見ると、有意な相関が得られた。

The enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) was used to determine the excretion of Tamm-Horsfall glycoprotein (THP) in neonatal urine. Anti-THP anti-THP antibody immobilized antibody and secondary antibody (labeled antibody) immobilized antibody immobilized antibody Use it. The matrix solution was prepared using Kirkegaard&Perry Laboratories 'TMB Microwell Peroxidase Substrate System, and the standard curve was prepared using Biomedical Technologies' Human Tamm-Horsfall glycoprotein. After the immobilized antibody is heated to 1000 times the normal temperature and reacted overnight at 4 ° C, the washing sample and standard solution are added and then reacted overnight at 4 ° C. The labeled antibody was detected at 50,000 times, 2 minutes reaction time, 20 minutes reaction time, and absorbance at 450nm. The assay sensitivity is 10ng/ml 1000ng/ml. THP concentrations in urine of normal newborns were 18.8 mg/L on average, 10.2 mg/L on average and 7.1 mg/L on average. The relationship between kidney volume and THP excretion in urine was found intentionally.