牛脳毛細血管内皮細胞を用いた脳腫瘍指向性リポソームの血液関門透過性の検討

牛脑毛细血管内皮细胞检测脑肿瘤脂质体的血屏障通透性

• 批准号: 05771025
• 负责人: 山下 弘己
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05771025/
• 关键词: 脳血管内皮細胞; 血液脳関門; リポソーム

1)牛脳灰白質より分離抽出した細胞が脳血管内皮細胞であることの確認を、免疫組織学的手法を用いて行った。初代培養した細胞には高頻度に第8因子関連抗原(von Willebrand factor)が証明され、また形態的にも紡錘形の細胞の密な増生が認められ、我々の用いた方法で高純度の脳微小血管内皮細胞を分離抽出することが可能であると判明した。2)リポソームの脳微小血管内皮細胞透過性をin vitroで検討した。内皮細胞をポリカーボネイト製の膜上に単層培養し、12-14日目に Side-bi-side Diffusion Cellに装着。フリーのシスプラチン、同薬剤を封入した通常の中性リポソームおよび多糖体(プルラン)で被覆した中性リポソームを用いて透過実験を行った。4℃の条件下ではフリーのシスプラチン、リポソーム群ともに脳微小血管内皮細胞透過性は極めてわずかであったが、37℃ではリポソーム群の透過性が4倍程度増大した。但し、フリーのシスプラチンも透過性亢進が認められ、3群間に統計学的な有意差を示すには至らなかった。リポソームはEnergy dependent transcellular transportにより血液脳関門を透過することが示唆されたが、単に細胞間よりのLeakageであった可能性もあり、現在詳細に検討中である。

The main results are as follows: 1) the grayish-white cow was isolated and extracted, the vascular endothelial cell was confirmed, and the immunological technique was used. In the first generation, we cultured the cells with high concentration, factor 8 antigen (von Willebrand factor), the shape of the cells, the density of the cells, the microvascular endothelial cells, the isolation and extraction of the microvascular endothelial cells. 2) the cellular permeability of microvascular endothelial cells was detected by in vitro. The endothelial cells were incubated with Side-bi-side Diffusion Cell on 12-14 days. This is the first time that the polysaccharides (polysaccharides) are usually coated with neutral polysaccharides. Under the condition of 4 ℃, the cell permeability of microvascular endothelium was 4 times higher than that of 37 ℃ and 37 ℃. However, the prevalence of sexual hyperpermeability was significantly higher than that in the control group, and the intentional difference in statistics among the three groups showed that there was a significant difference between the two groups. The possibility of instigation and instillation of blood cells in Energy dependent transcellular transport cells is not known through the use of blood samples. The possibility of instillation of blood cells in Leakage cells is not known.