ヒト培養血管内皮細胞におけるカテコラミンレセプターの定量及び量的変動についての検討

培养的人血管内皮细胞中儿茶酚胺受体的定量及其数量变化的研究

基本信息

  • 批准号:
    05771119
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.58万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    1993
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1993 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

1.研究目的 培養血管内皮細胞を用い、radioimmunoassayによりカテコラミンレセプターを定量し、更にその量的変動を明らかにすることは出血性ショックや敗血症性ショックの研究や治療の上に重要である。ところが近年分子生物学の進歩により、血管内皮細胞はそれ自身が種々の循環作動性物質を産生し、血管の緊張性を調節し、血液循環の動的平衡を支えていることが明らかになった。特に内皮由来血管収縮因子であるエンドセリン(ET-1)と内皮由来血管弛緩因子である一酸化窒素(NO)は局所の血流動態に重要な役割を演じていると考えられており、ショック発現にも関与している可能性がある。そこで、ショックの患者の麻酔導入によく使用される静脈麻酔薬であるケタミンがこれらの因子の産生にどのような影響を与えているのかまず検討した。2.研究方法 国立衛生試験所細胞バンクより供給を受けたウシ肺動脈血管内皮の細胞株を、12穴のマルチプルシャーレ(直径2.4cm)4枚に均等に継代し、20%ウシ胎児血清加イ-グルMEM培地で培養(5%CO2.95%air.37℃)した。コンフルエントに達した後、各種濃度(0.10^<-7>〜10^<-3>M)のケタミン含有無血清イ-グルMEM培地で新たに24時間培養し、その上清を検体として用いた。ET-1の測定は酵素免疫測定法を用い、各シャーレのET-1分泌量は生細胞数10,000あたりで補正した。3.研究成果 ケタミン24時間の負荷は、10^<-7>〜10^<-3>Mの各濃度群とも、ウシ肺動脈の培養血管内皮細胞からのET-1産生を有意に抑制することを明らかにした。(第41回日本麻酔学会にて発表予定)4.今後の展開 現在ウシ頚動脈培養血管内皮、ヒト大動脈培養血管内皮についても同様に検討中である。今後は更にNO産生に対する影響も調べ、ET-1産生との相互関係について明らかにしたい。
1. Objective: To study the importance of vascular endothelial cell culture, radioimmunoassay, quantitative analysis, quantitative analysis, and quantitative analysis of changes in vascular endothelial cells. In recent years, advances in molecular biology have led to the production of circulating substances in vascular endothelial cells, the regulation of vascular hypertonicity, and the balance of blood circulation. In particular, endothelium-derived vasoconstrictor (ET-1) and endothelium-derived vasorelaxant (ET-1) are important factors in regulating blood flow dynamics. For example, the use of intravenous anesthetics in patients with acute respiratory failure may affect the production of these factors. 2. Methods: Four cells from the National Institute of Health were cultured in MEM (5%CO2. 95%air. 37 ℃) with 20% fetal serum. After reaching the highest concentration, various concentrations (0.10^<-7>~ 10^<-3>M) of serum were added to the culture medium containing serum-free MEM for 24 hours. ET-1 was measured by enzyme immunoassay, and the amount of ET-1 secreted was corrected by 10,000 cells. 3. Results: <-7><-3>ET-1 production in cultured vascular endothelial cells of pulmonary arteries was intentionally inhibited by 24-hour loading at concentrations ranging from 10^ M to 10^ M. 4. Future development of vascular endothelial culture and vascular endothelial culture. In the future, NO production will affect the regulation of ET-1 production and the relationship between them will be clarified.

项目成果

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