高齢化に伴う歯肉線維芽細胞のマトリックス成分の代謝活性

牙龈成纤维细胞基质成分随衰老的代谢活性

• 批准号: 05771651
• 负责人: 堀口 優美
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Asahi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05771651/
• 关键词: 歯肉線維芽細胞; 性ホルモン; DNA合成

幼弱ラット(1-7週齢)及び成熟ラット(30週齢)の下顎臼歯部歯肉を採取し、細断後α-MEM培地で培養を行い5-8代継代培養した細胞を使用し、歯肉線維芽細胞の増殖様式、細胞数を位相差顕微鏡を用いて観察したが両者に差は見られなかった。DNA合成能の測定は、幼弱ラット、成熟ラットそれぞれの細胞を48穴マルチウエルプレーチに1穴当たり2×10^3個の細胞を播種し、単層を形成するまで培養し^3H-チミジンを3μCi/mlの濃度になるように添加して1時間のパルスラベルを行い、DNAへの取り込み量から算定した。結果、両者に有意差は見られなかった。細胞間マトリックスの産生能について、一定期間培養した培養液中に遊出したコラーゲン、プロテオグリカン、グリコサミノグリカンについて電気泳動及びモノクローナル抗体を用いて酵素免疫測定法により検討したが、いずれも絶対量の不足のために定量できなかった。エストローゲンセレプターについては、一定期間培養した細胞をAnti-Estrgenモノクローナル抗体を使用しビオチン-ストレプトアビジンシステムによる免疫染色を行い検討したが検出できなかった。また、培養液中にβ-Estradiol(PSL社)を10^<-2>-10^<-8>Mの濃度にそれぞれ調整し、添加したものについても同様に検討したが、結果は得られなかった。

Young (1-7 weeks old) and mature (30 weeks old) mandibular dental buds were cultured in α-MEM medium for 5-8 passages after harvesting and thinning. The cells were cultured in vitro. The growth pattern and cell number of mandibular dental buds were observed by microscope. DNA synthesis activity was measured in 48 cells from young, mature, and mature cells. When 2×10^3 cells were seeded, layers were formed, cultured, and added at a concentration of 3μCi/ml for a period of time. The amount of DNA was calculated. As a result, the intentional difference between the two is not seen. The production of cell-to-cell proteins can be detected by enzyme immunoassay, and the amount of protein can be quantified by enzyme immunoassay. The cells were cultured for a certain period of time. Anti-Estrgen antibodies were used for immunostaining. The concentration of β-Estradiol(PSL) in the culture solution was adjusted to 10^<-2>-10 ^<-8>M. The results were obtained by adding the same solution.