リン内殻吸収によって生じた酵母染色体DNA二重鎖切断の生成効率と修復されやすさ

磷内壳吸收引起的酵母染色体DNA双链断裂的生成效率和修复难易度

• 批准号: 05780398
• 负责人: 宇佐美 徳子
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: National Laboratory for High Energy Physics
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05780398/
• 关键词: 放射線生物学; 単色軟X線; シンクロトロン放射; DNA二重鎖切断; パルスフィールドゲル電気泳動; 酵母; 内殻吸収; DNA修復

これまで酵母菌を用いた実験より,DNA中のリン原子が直接エネルギーを吸収する過程により修復されにくい致死損傷が生じていることが示唆される結果を得た.本研究では,リン原子の光吸収により生じた二重鎖切断の酵母菌の修復過程による修復効率を調べた.二重鎖切断修復欠損株および野生株を用い,両者の二重鎖切断の生成収率の比を二重鎖切断の修復効率とした.照射にはリン酸基に起因する吸収ピークである2153eVおよび対照として2147eVの2種類の単色軟X線を用いた.もしリンK殻吸収によって「修復されやすさ」の異なる二重鎖切断が生じているならば,2つのエネルギーでの鎖切断修復効率は異なるはずである.二重鎖切断の定量はパルスフィールドゲル電気泳動を用いた.泳動後のDNAの定量は,従来はネガフィルムの黒化度をデンシトメータで測定する方法をとっていたが,今回は染色したゲルをCCDカメラで撮影し画像解析する方法を採用し,露出時間を1/100程度に短縮できた.二重鎖切断欠損株では,どちらのエネルギーでも1致死事象あたり約2個の二重鎖切断が生じていた.しかし予想に反し,修復効率はリンK殻吸収の有無で差はなく,リンの光吸収によって生じた二重鎖切断は他の元素の光吸収により生じた二重鎖切断と同じ効率で修復されていた.したがって致死損傷から示唆された修復されにくい損傷は,今回の検出法で検出可能な二重鎖切断ではないことが明らかになった.この方法では無傷のまま残ったDNA量を基にして切断数を求めているため,照射後DNA複製が起こらないことを前提としている.しかし二重鎖切断の修復効率が致死損傷の修復効率に比べ小さいことから,DNA複製前には修復過程が完全に行なわれていないと思われ,この段階ではリンの光吸収によって生じた損傷の「修復されやすさ」の違いは検出できないと考えられる.の成果は1994年4月に英国で開催される第18回グレイ会議で口頭発表を行なうことになっている.

This is the result of the direct absorption of atoms in DNA by yeast and the repair of lethal damage. In this study, we investigated the effect of double lock on the recovery of yeast by atomic absorption spectroscopy. Double lock cut repair defect plant and wild plant, double lock cut recovery rate ratio of double lock cut repair rate. Two kinds of single color soft X-rays are used for irradiation due to absorption of 2153eV and irradiation of 2147eV. The double lock disconnection occurs when the "repair" occurs, and the lock disconnection repair efficiency of the "repair" occurs when the "repair" occurs. The double lock switch is used for quantitative analysis. The quantitative analysis of DNA after swimming has been carried out in the past, and the method for determining the degree of blackness of the DNA after swimming has been adopted. Now, the method for analyzing the DNA after staining has been adopted, and the exposure time has been shortened by 1/100. Double lock cut short plant, For example, if the light absorption ratio of the light source is higher than the absorption ratio of the light source, the light absorption ratio of the light source is higher than the absorption ratio of the light source. Deadly damage is indicated by repair. Damage is indicated by repair. Now, the method of detection can detect double lock disconnection. This method is based on the premise that DNA replication can be initiated after irradiation without damage and residue. The repair efficiency of double-lock cleavage is lower than that of lethal damage. The repair process before DNA replication is completely completed. The results were announced orally at the 18th British Conference in April 1994.

项目成果

Kobayashi,K.: "Performance of the Irradiation Apparatus for Radiation Biology Studies at Beamline 27 in the Photon Factory.(abstract)" Journal of Radiation Research. 34. 110 (1993)

Kobayashi,K.：“光子工厂 27 号光束线用于辐射生物学研究的辐照装置的性能。（摘要）”辐射研究杂志。

Usami,N.: "Repair of DNA Double Strand Breaks Produced by Phosphorus Photoabsorption in Yeast Cells.(abstract)" Journal of Radiation Research. 34. 396 (1993)

Usami,N.：“修复酵母细胞中磷光吸收产生的 DNA 双链断裂。（摘要）”辐射研究杂志。

Usami,N.: "Quantitative Measurement of DNA Double Strand Breaks Produced by Phosphorus Photoabsorption in Yeast Cells by Using Pulse Field Gel Electrophoresis.(abstract)" Journal of Radiation Research. 34. 111 (1993)

Usami,N.：“使用脉冲场凝胶电泳定量测量酵母细胞中磷光吸收产生的 DNA 双链断裂。（摘要）”辐射研究杂志。

宇佐美 徳子: "細胞のDNA修復機能をプローブとしたリンK殻吸収によって生じる分子損傷の性質の研究" SR科学技術情報. 3(9). 9-16 (1993)

Noriko Usami：“以细胞 DNA 修复功能为探针研究磷 K 壳吸收引起的分子损伤的性质”SR 科学技术信息 3(9)。