住民検診の血餅を利用したDNAバンクの作製

利用住院医生检查的血凝块创建 DNA 库

• 批准号: 05857025
• 负责人: 金井 信行
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 1994
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05857025/
• 关键词: DNA抽出; 血餅; PCR; 住民検診; 地域治療

従来遺伝子DNAの抽出にあたっては抗擬固剤 を入れ、新たに採血するのが一般的であった。また抽出方法についても、面倒な白血球の分離やフェノールといった 危険な薬剤を使用するのが通常の方法である。今回私は地域住民の遺伝子解析のため、普段は廃棄されている住民検診の血清除去の血餅を利用したDNAの容易な抽出方法を開発した。住民検診の血餅200mulをProteinase K を含むLysis solution で処理後、飽和食塩水とクロロホルムで混和後、上澄を90%エタノールで沈殿させDNAを回収した。エタノール沈殿の際に純エタノールを使用せず、90%エタノールを使用することにより、PCR増幅の阻害となりうる過剰な塩分、赤血球色素の除去が効率よく行われることが判明した。このDNAはかなり純粋なもので、100回以上のPCR(Polymerase chain extension)が可能で、なおかつ長期の冷蔵庫保存にも耐える。100回以上のPCRが可能ということはある遺伝子疾患についてその遺伝子坐位を特定可能であることを意味する。また方法が診療所の検査室レベルでも可能であり、危険、高価な試薬を使う必要がない。また住民検診の血餅を用いることにより検体が収集しやくすく、遺伝的集積の強いと考えられる地域の遺伝子解析を容易ならしめるものと考えられ、現在J Clin Patholに投稿中デアル。なお現在地域住民の病態、住民検診のデータのと関連について、angiotensin converting ernzyme,CYPA1A,apoproteinの遺伝子や、polymorphism を示す、遺伝子markerについてPCRで可能なものについて解析中である。

The original DNA extraction method is the anti-implantation test, and the new blood collection method is the normal test. The extraction method is the same as the white blood cell separation method, and the white blood cell separation method is the normal method. This time, we will analyze the remaining DNA of the local residents and use it to remove the blood cake and use the easy extraction method of DNA. Resident Clinic Blood Cake 200mulをProteinase K をContainsむLysis solution After treatment, the saturated food was mixed with water, and 90% purified DNA was recovered. P It was found out that the efficiency of CR amplification and the removal of red blood cell pigments was determined by passing the test. The DNA is pure, the PCR (Polymerase chain extension) is possible for more than 100 times, and the DNA is long-term cold storage resistant. More than 100 times of PCR is possible, and it is possible that the patient's illness is caused by the disease. The method of checking the clinic's examination room is possible, the risk is high, the test is necessary, and the test is necessary.また Resident Clinic のblood cakeを Use いることにより検体が to collect しやくすく、Collection of remains のStrong いとtest えられるRegional の缝子ANALYSIS をeasy ならしめるものとtest えられ、Now J Clin Pathol's contribution is made by デアル.なおThe current disease of the local residents, the resident examination のデータのとrelated について, angiotensin converting ernzyme, CYPA1A, apoprotein の缝子や, polymorphismを Show す、缝子markerについてPCRでpossibleなものについて中である.