TSH受容体発現CHO細胞を用いた抗TSH受容体抗体の多様性に関する検討

使用表达TSH受体的CHO细胞研究抗TSH受体抗体的多样性

• 批准号: 05857110
• 负责人: 渡辺 文絵
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05857110/
• 关键词: 抗TSH受容体抗体; CHO細胞

自己免疫性甲状腺疾患であるバセドウ病や特発性甲状腺機能低下症の原因に抗TSH受容体抗体の存在が考えられている。そこで抗TSH受容体抗体の作用機序を解明するべく以下の実験を行った。1)教室で分離したTSH受容体遺伝子(TSHR)をDNA発現ベクター(PGEMX)組み込み(PGEMX‐TSHR)、電気的刺激により哺乳類動物細胞(CHO細胞)に発現させたCHO‐K1細胞に対するTSHの結合能を^<125>I標識TSHとの結合能により測定した。2)TSH受容体発現細胞に対する抗TSH受容体抗体結合能を患者血清次いで^<125>I標識Protein‐Aとの反応を調べ測定した。3)TSH受容体発現細胞にTSHおよび抗TSHおよび抗TSH受容体抗体を添加し、細胞内のc‐AMP産生量を指標に刺激活性を測定した。4)TSH受容体cDNAの全塩基配列をジデオキシ法を用いて決定し、受容体分子の構造解析を行っているところである。

The existence of anti-TSH receptor antibodies as a cause of autoimmune thyroid disease and idiopathic hypothyroidism The mechanism of action of anti-TSH receptor antibody was clarified. 1)TSH receptor gene (TSHR) was isolated from mammalian cells (CHO cells) and its binding energy was determined by DNA detection (PGEMX) and electrical stimulation (PGEMX-TSHR<125>). 2) Anti-TSH receptor antibody binding activity in TSH receptor producing cells was measured in the serum of the patients<125>. 3)TSH receptor producing cells TSH, anti-TSH and anti-TSH receptor antibodies were added, intracellular c-AMP production and stimulation activity were measured. 4)TSH receptor cDNA complete base ligand sequence determination, receptor molecular structure analysis and analysis.