TSH受容体発現CHO細胞を用いた抗TSH受容体抗体の多様性に関する検討

自己免疫性甲状腺疾患であるバセドウ病や特発性甲状腺機能低下症の原因に抗TSH受容体抗体の存在が考えられている。そこで抗TSH受容体抗体の作用機序を解明するべく以下の実験を行った。1)教室で分離したTSH受容体遺伝子(TSHR)をDNA発現ベクター(PGEMX)組み込み(PGEMX‐TSHR)、電気的刺激により哺乳類動物細胞(CHO細胞)に発現させたCHO‐K1細胞に対するTSHの結合能を^<125>I標識TSHとの結合能により測定した。2)TSH受容体発現細胞に対する抗TSH受容体抗体結合能を患者血清次いで^<125>I標識Protein‐Aとの反応を調べ測定した。3)TSH受容体発現細胞にTSHおよび抗TSHおよび抗TSH受容体抗体を添加し、細胞内のc‐AMP産生量を指標に刺激活性を測定した。4)TSH受容体cDNAの全塩基配列をジデオキシ法を用いて決定し、受容体分子の構造解析を行っているところである。

自己免疫性甲状腺疾患であるバセドウ病や特発性甲状腺機能低下症の原因に抗TSH受容体抗体の存在が考えられている。そこで抗TSH受容体抗体の作用機序を解明するべく以下の実験を行った。1)教室で分離したTSH受容体遺伝子(TSHR)をDNA発現ベクター(PGEMX)組み込み(PGEMX‐TSHR)、電気的刺激により哺乳類動物細胞(CHO細胞)に発現させたCHO‐K1細胞に対するTSHの結合能を^<125>I標識TSHとの結合能により測定した。2)TSH受容体発現細胞に対する抗TSH受容体抗体結合能を患者血清次いで^<125>I標識Protein‐Aとの反応を調べ測定した。3)TSH受容体発現細胞にTSHおよび抗TSHおよび抗TSH受容体抗体を添加し、細胞内のc‐AMP産生量を指標に刺激活性を測定した。4)TSH受容体cDNAの全塩基配列をジデオキシ法を用いて決定し、受容体分子の構造解析を行っているところである。