SCIDマウスを用いたヒト型モノクローナル抗体作製法の開発及びその臨床応用の研究

SCID小鼠人单克隆抗体生产方法的开发及临床应用研究

• 批准号: 06771360
• 负责人: 福地 剛
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06771360/
• 关键词: ヒト型モノクローナル抗体; 子宮体癌; Lewis^b型糖鎖; SCIDマウス

1.SCID-huマウスにおける、ヒト型抗体の作製SCIDマウスにヒト末梢血リンパ球を移植したSCID-huマウスを用いて、ヒト型モノクローナル抗体の作製を試みた。今回の研究目的を子宮体癌に対する特異的なヒト型抗体の作製としたため、当初は体癌由来培養細胞株を抗原として、SCID-huマウスに免疫した。抗原の投与経路、投与スケジュール、細胞融合のタイミング、方法などについて検討を重ね、SCID-huマウスの系におけるヒト型モノクローナル抗体の作製に成功した。当研究室にて樹立したヒト子宮体癌由来培養細胞株SNG-S及びその細胞膜分画lysateを免疫原とし、SCID-huマウスに免疫しマウス脾細胞とヒト、マウスヘテロミエローマ細胞とをPEGを用いて細胞融合した。その結果、高い効率でヒト型抗体を産生するハイブリドーマを樹立した。そのうち体癌細胞に反応する抗体産生株をスクリーニングし、最終的に4種のモノクローナル抗体を得たが、いずれも免疫組織化学的検索の結果、非特異的なものであった。2.ヒト型抗Lewis^b型糖鎖抗体の作製ここまでの検討の結果、ハイブリドーマの融合効率については再現性を持った良い成績が得られるようになったが、最終的に得られた抗体は特異性に乏しく、その対策として免疫原により純粋な物質を用いることとした。過去当研究室で樹立したマウス型抗子宮体癌モノクローナル抗体MSN-1は体癌と高率に反応することが確認されており、その認識抗体は主にLewis^b型糖鎖である。そこで、Lewis^b型糖鎖を糖脂質の形にして免疫原とし、MSN-1をコントロールにアッセイを行い抗Lewis^b型糖鎖抗体を作製することとした。そこで今回、免疫原が変わったため免疫のスケジュールを改めて検討する必要があり、現在検討中である。

1. SCID - hu マ ウ ス に お け る, ヒ ト type antibody の cropping SCID マ ウ ス に ヒ リ ト peripheral blood ン パ ball を transplantation し た SCID - hu マ ウ ス を with い て, ヒ ト type モ ノ ク ロ ー ナ ル を try the antibody の cropping み た. Today back to の research purpose を uterine body carcinoma に す seaborne る specific な ヒ ト type antibody の cropping と し た た め, original は origin culture cell lines を body carcinoma antigen と し て, SCID - hu マ ウ ス に immune し た. Cast and 経 road, cast and antigen の ス ケ ジ ュ ー ル, cell fusion の タ イ ミ ン グ, method な ど に つ い て beg を 検 ね, SCID - hu マ ウ ス の is に お け る ヒ ト type モ ノ ク ロ ー ナ ル に success the antibody の cropping し た. When laboratory に て set し た ヒ ト origin culture cell lines SNG -s and uterine body carcinoma び そ の membrane points draw lysate を immunogen と し, SCID - hu マ ウ ス に immune し マ ウ ス spleen cells と ヒ ト, マ ウ ス ヘ テ ロ ミ エ ロ ー マ cells と を PEG を with い て cell fusion し た. Youdaoplaceholder0 そ results, high そ efficacy でヒト type antibodies を produce するハ <s:1> ブリド を を を establish た. そ の う ち body cells に anti 応 す る antibody generation plants を ス ク リ ー ニ ン グ し, eventually に four の モ ノ ク ロ ー ナ を ル antibody to た が, い ず れ も immunohistochemical 検 suo の results, nonspecific な も の で あ っ た. 2. ヒ ト Lewis resistant ^ b antibody の sugar lock cropping こ こ ま で の beg の 検 results, ハ イ ブ リ ド ー マ の fusion rate of unseen に つ い て は reproducibility を hold っ い た good grades が have ら れ る よ う に な っ た が, final に ら れ は た antibody specificity に spent し く, そ の policy と seaborne し て immunogen に よ り pure 粋 な material を with い る こ と と し た. In the past when laboratory で set し た マ ウ ス type resistance uterine body carcinoma モ ノ ク ロ ー ナ ル antibody は body carcinoma と high rate に MSN - 1 against 応 す る こ と が confirm さ れ て お り, そ の knowledge antibody は Lord に Lewis ^ b sugar lock で あ る. そ こ で, Lewis ^ b lock を sugar sugar lipid の form に し て immunogen と し, MSN - 1 を コ ン ト ロ ー ル に ア ッ セ イ resistance line を い Lewis ^ b antibody を sugar lock cropping す る こ と と し た. そ こ で today back, immune が - わ っ た た め immune の ス ケ ジ ュ ー ル を change め て beg す 検 る necessary が あ り, now 検 please で あ る.