パルスフィールド電気泳動法を用いた歯周疾患、関連細菌の家族内伝播の検索

利用脉冲场电泳寻找牙周病的家族传播及相关细菌

• 批准号: 06772022
• 负责人: 広瀬 公治
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Health Sciences University of Hokkaido
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06772022/
• 关键词: 成人性菌周疾患; Porphyromonas gingivalis; DNA; 家族内伝播

成人性菌周疾患関連細菌として注目されているPorphyromonas gingivalis(以下Pg)の家族内伝播を調べる一助として4組の夫婦間から分離されたPgのDNAの電気泳動パターンを、巨大DNAを画分処理することのできるパルスフィールド電気泳動法により検索したところ以下のような結果を得た。1)制限酵素未処理DNA泳動パターン:DNA抽出法の検定およびNativeなDNAの状況を調べるために制限酵素未処理のDNA泳動パターンについてまず検索を行なった。その結果、調べた8菌株間に特異な差を認めることはできなかった。2)8塩基認識制限酵素切断DNA泳動パターン:8塩基認識制限酵素として知られるNotIおよびSfiIによりPgDNAを切断し、パルスフィールド電気泳動によりそのパターンを検索した。その結果、NotI処理を行なったものにおいて2組の夫婦の泳動パターンがほぼ同一であったが、その他2組の夫婦間においては必ずしも同一ではなかった。またSfiI処理群においては明瞭なバンドが認められなかった。またよく用いられる基準株であるPg381株との比較したところ各夫婦から分離されたPgのDNA泳動パターンは異なっていた。以上の結果より、本パルスフィールド電気泳動法を用いた検索において夫婦間でのPgの伝播が示唆された。よって各分離菌株に特異的なDNA断片を調製し、各々のDNAとサザンハイブリダイゼーションを行ない、より特異性の高い検索法を構築する必要がある。

The results showed that four groups of couples isolated Pg DNA by electrophoresis were able to detect and detect the intrafamilial transmission of Porphyromonas genivalis (Pg). 1)Limiting enzyme unprocessed DNA migration:DNA extraction method for detection and regulation of Native DNA status The results of the study showed that there was a difference between the 8 strains. 2)8-base recognition restriction enzyme cut DNA movement:8-base recognition enzyme The result is that the two groups of couples are swimming together, and the other two groups are swimming together. SfiI processing group is not clear. Pg381 strain was isolated from each other by DNA electrophoresis. The above results show that the use of electrokinetic methods in the detection of Pg between husband and wife It is necessary to modulate the specific DNA fragments of each isolate, and construct the specific DNA fragments.