LP(a)測定のためのリコンビナント標準物質の開発

LP(a)测定用重组标准物质的开发

• 批准号: 06772221
• 负责人: 久保 信彦
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06772221/
• 关键词: lipoprotein(a); apolipoprotein(a); イムノアッセイ; 標準物質

抗体を使用してLiporotein(a)(Lp(a))を測定する場合に働くLp(a)/apo(a)エピトープにはさまざまなものがあると考えられるが,標準物質の必要条件としてこれらを多数保有する必要がある。Lp(a)の測定のためのリコンビナント標準物質を開発するために,我々はLp(a)測定に関わるapolipoprotein(a)(apo(a))のクリングル構造の一部を含むいくつかの重要なエピトープを同定した。多くの市販Lp(a)測定試薬に含まれる抗Lp(a)/apo(a)抗体はLp(a)/apo(a)の三次構造の一部を認識しているものと考えられたが,一部のものはペプチドエピトープを認識していることを明らかにした。さらに,我々はLp(a)/apo(a)の還元処理により出現する新たなエピトープが各種動脈硬化症の患者血清で高値を示すことを明らかにした。標準リコンビナントapo(a)を開発するために,我々はλgtllのhuman liver cDNAlibraryを入手して,抗Lp(a)/apo(a)抗体でスクリーニングして数種類の陽性コロニーを得た。使用した抗体はポリクローナル抗体であるので,このphage液には複数のLp(a)/apo(a)エピトープが含まれているものと考えられる。そこで,現在我々はこのphage液中にどのようなエピトープがどの程度含まれているのかを幾つかのモノクローナル抗体を使用して検出中である。完成した標準物質とするためには,ラテックス凝集法,免疫比濁法,酵素抗体法など各種の測定方法のシステムでこの物質が測定可能な物質とする必要がある。今回の研究の過程であるエピトープペプチドを表面にコートしたリポソームは,限られた測定系で有効な標準物質として使用できることがわかった。このため今回の期間内には検討できなかったが,我々はこれらのエピトープを含むphage液からリコンビナント蛋白のみを精製して,さらにこれをリポソームに結合させることによりどの測定系でも利用が可能なLp(a)測定のための標準物質を開発することを試みている。

When Liporotin (a)(Lp(a)) is used, the Lp(a)/apo(a) ratio is determined. Lp(a) determination of apolipoprotein(a)(apo (a)) determination of apolipoprotein (a)(apo (a)) determination of apolipoprotein (a) determination of apolipoprotein(a)(apo(a)) determination of apolipoprotein(a) determination of apo (a) determination of apolipoprotein (a) determination of apolipoprotein (a) determination of apo (a) determination of apolipoprotein (a) determination of apo (a) determination of apo (a) Lp(a) assay contains anti-Lp (a)/apo (a) antibodies. In addition, we found that Lp(a)/apo(a) was higher in serum of patients with various kinds of atherosclerosis. The standard Lp(a)/apo(a) antibody was developed by using the human liver cDNA library of λgtll. The use of antibodies is not limited to Lp(a)/apo (a), but rather to Lp(a)/apo(a). In this case, the phage-containing antibody is used to detect the presence of the antibody. Complete the standard material, agglutination method, immunoturbidimetry, enzyme antibody method, various methods of determination of the substance, determination of possible substances and necessary. The process of this study is to limit the use of standard materials. During this period of time, we have been studying and refining the protein in the phage-containing solution, and developing the standard material for the determination of Lp(a) by using the assay system.

项目成果

S.Yamada,Y.Noguchi,N.Endo,N.Kubo and I Sakurabayashi: "Design of the autibody production by synthetic peptides and establishment of cipoprotein(a) measurewent" Preceeding book from XV11 Ivorld Congress of Anatonic and Cliuical Pathology (MONDVZZI EDITORE.

S.Yamada、Y.Noguchi、N.Endo、N.Kubo 和 I Sakurabayashi：“通过合成肽生产自体抗体并建立环蛋白 (a) 测量的设计”前书来自 XV11 Ivorld 解剖学和临床病理学大会 (MONDVZZI)

井上恵一,久保信彦他: "各種虚血性疾患患者血中のLp(a)エピトープ検出によるLp(a)濃度の測定" 動脈硬化. 22. 436- (1994)

Keiichi Inoue、Nobuhiko Kubo 等：“通过检测各种缺血性疾病患者血液中的 Lp(a) 表位来测量 Lp(a) 浓度”动脉硬化。