発生発育に伴う網膜におけるTGFβ1及びbFGFの局在と変化

发育过程中视网膜中TGFβ1和bFGF的定位和变化

• 批准号: 06770007
• 负责人: 孔 永利
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770007/
• 关键词: 免疫組織化学; In situ hybridization; TGFβ1 and bFGF; mRNAs; 眼球組織; マウス; 加齢変化

発生発育に伴うマウス眼球組織におけるTGFβ1とbFGF及びそれらのmRNAsの局在と加齢変化を免疫組織化学法ならびにIn situ hybridization法により検討した。胎生14,16,19日、生後1,3,5,7,14,21,28,42,70日のBALB/cマウスの眼球を材料とした。4%パラホルムアルデヒトで灌流固定し、取り出した眼球を凍結切片にした。免疫組織化学法ではTGFβ1及びbFGFウサギpolyclonal抗体を使用し、ABC法を行い、DAB反応で発色した後、光学顕微鏡により陰性と陽性を判定した。In situ hybridization法では^<35>S標識TGFβ1及びbFGF oligonucleotide probesを使用し、切片上に乳剤を適用した後、露出、現像、明暗視野の光学顕微鏡で銀粒子の局在を確認した。その結果、免疫組織化学ではTGFβ1及びbFGFともに網膜の視神経細胞層、内外網状層、色素上皮層、脈絡層、強膜層及び網膜と脈絡層にある血管内皮細胞に陽性反応が見られた。bFGFではミューラー細胞の突起を特異的に染めた。加齢による変化は胎生早期(E14-E16)では網膜内神経芽細胞層(視神経細胞層になる)が弱陽性であり、胎生後期(E19)の視神経細胞層は陽性で、生後は強陽性であった。In situの結果ではTGFβ1及びbFGFのmRNAsを示す特異的な銀粒子は強膜層に数多く見られ、脈絡層には少数観察された。そして、胎生後期では強膜層の銀粒子数は胎生早期よりかなり多かった。網膜においてはカブリレベルの銀粒子数が検出された。本研究は以下の結論を得た:TGFβ1及びbFGFのmRNAsは強膜と脈絡膜で合成され、TGFβ1及びbFGFの蛋白質は何らかの方式で網膜にある標的細胞に転送された。また、TGFβ1とbFGF及びそれらのmRNAsは胎生後期から大きな変化が見つかった結果から、TGβ1及びbFGFは胎生後期から成体に至る網膜の発生発育に重要な役割を演じていると推定される。

発 raw 発 yukon に with う マ ウ ス eyeball organization に お け る TGF beta 1 と bFGF and び そ れ ら の mRNAs の bureau In と 齢 variations change を immune histochemical methods な ら び に the In situ hybridization method に よ り beg し 検 た. 1,3,5,7,14,21,28,42,70 viviparous,16,19 14 days, after の BALB/c マ ウ ス の eyeball を material と し た. 4%パラホ ムア ムア デヒトで デヒトで perfusion fixation パラホ, take out パラホ た eyeball を frozen section に た た. Immune histochemical methods で は TGF beta 1 and び bFGF ウ サ ギ を using polyclonal antibody し line, ABC method を い, DAB 応 で 発 color し た after, optical 顕 micromirror に よ り negative と positive を decide し た. The In situ hybridization method で は ^ < > 35 S identity TGF beta 1 and び bFGF oligonucleotide the probes を use し に milk tonic を apply, slicing し た, show, now like a vision, light and shade の optical 顕 micromirror で silver particles の bureau In を confirm し た. そ の results, immunohistochemical で は TGF beta 1 and び bFGF と も に retinal の god 経 cell layer, inner and outer plexiform layer, pigment on cortex, venation, strong membrane layer and び retinal と context に あ る に positive anti endothelial cells 応 が see ら れ た. bFGFで ュ ュ ュ ラ ラ めた specific に staining めた. Add 齢 に よ る variations change は viviparity (E14 - E16) early で は god 経 bud cells within the retina layer (see god 経 cell layer に な る) が weakly positive で あ り, late viviparity (E19) の god 経 cell layer は positive で, は after strong positive で あ っ た. The In situ の results で は TGF beta 1 and び bFGF の mRNAs を す specific な silver particles In strong は film に more く see ら れ, choroid layer に は minority 観 examine さ れ た. Youdaoplaceholder0 て て, で in the later stage of pregnancy, the strong film layer has <s:1> the number of silver particles <e:1>, and in the early stage of pregnancy, there are よ な な った and った. The number of silver particles in the retina is が検 out of された. Under this study は の conclusion を た : TGF beta 1 and び bFGF の mRNAs は strong membrane と choroid で synthetic さ れ, TGF beta 1 and び bFGF の protein は what ら か の way で retinal に あ る target cells に planning send さ れ た. ま た, TGF beta 1 と bFGF and び そ れ ら の mRNAs は viviparous late か ら big き な variations change が see つ か っ た results か ら, TG beta 1 and び bFGF は viviparous late か ら adult に to る retinal の 発 raw 発 yukon に cut を play important な service じ て い る と presumption さ れ る.