覚醒剤中毒における心筋障害の発生へのアポプト-ジスの関与の検討

细胞凋亡在兴奋剂成瘾心肌损伤发生中的作用研究

• 批准号: 06770322
• 负责人: 袖崎 賢一郎
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: 佐賀医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770322/
• 关键词: 覚醒剤中毒; 細胞培養; アポト-ジス

覚醒剤の心筋に対する毒性の発現にアポト-ジス(細胞枯死)が関与しているかどうかを調べるために成熟ラット心筋細胞を用いて以下の実験を行った。1.培養心筋細胞の調整:WistarKYラットから麻酔下に心臓を摘出し、Langendorff 灌流を行い、Kreds-Henseleit 液で灌流し、Collagenase で灌流した。心室のみを細切し、メッシュで細胞を単離し、adhesion法で非心筋細胞を除き、単離心筋細胞を得た。2.覚醒剤処理:Methamphetamine(MA)を培養液中に1×10^<-3>Mを加えたものと加えない対照群を35mm培養皿(細胞数 1×10^6)で4時間培養した。3.DNAの抽出と解析:培養細胞は遠心して集め、RNase,Nonident P40 を加えたTris EDTA緩衝液と混合し、37℃でインキュベートした後、Proteinase Kで処理し、フェノールエイチジウムブロマイドで染色し、紫外線下にて観察した。結果 形態的には対照群では明瞭な横紋構造を保った正常に近い形の心筋細胞がみられた。MA処理群は横紋の消失や空胞変性が著しく、細胞死も発生していた。しかしながらアポト-ジスに特異的といわれる形態的変化やDNAの断片化は認めることはできなかった。現在各種の条件等を変更した場合を検討している。

The development of toxicity in the heart muscle of the wake-up agent is related to the development of the mature heart muscle cells. 1. The regulation of cultured cardiac muscle cells:WistarKY, Langendorff, Kreds-Henseleit, Collagenase. The heart is divided into two parts, the heart is divided into two parts, the heart is divided into three parts, the heart is divided into two parts, the heart is divided into three parts, the heart is divided into three parts, the heart is divided into four parts, the heart is divided into three parts, the heart is divided into four parts, the heart 2. Wake up treatment:Methamphetamine(MA) 1×10^ M in culture medium<-3>, add it to the culture medium, and culture for 4 hours in 35mm culture dish (cell number 1× 10 ^6). 3. DNA extraction and analysis: Cultured cells were isolated, RNase,Nonident P40, Tris EDTA buffer, mixed at 37℃, Proteinase K treated, stained, and observed under ultraviolet light. The morphology of the cells is similar to that of the normal cells. MA treatment group has no horizontal lines, no empty cells, no cells. The DNA fragments of the DNA fragments were identified by the special morphology of DNA fragments. Now all kinds of conditions are changed.