抗子宮体癌モノクローナル抗体を用いたミサイル療法の基礎的研究

(1)免疫複合体の作製:当研究室で作製した,子宮体癌細胞上に出現する糖鎖抗原を特異的に認識するモノクローナル抗体MSN-1(IgM)と,抗癌剤アドリアマイシン(ADM),植物毒gelonin,及びコブラ毒phospholipase A_2(PLA_2)を,SPDPと2-iminothiolaneを用いてS-S結合させ,それぞれMSN-1-ADM複合体,MSN-1-gelonin複合体,MSN-1-PLA_2複合体を作製し,ゲル濾過法,陽イオン交換クロマトグラフィー法により分離精製した。電気泳動法,densitometryによりMSN-1 1分子当たり,それぞれADMが平均47分子,geloninが平均13.8分子,PLA_2が平均11.8分子結合した事が判明した。(2)in vitroにおける殺細胞効果の検討:MSN-1-PLA_2複合体をMSN-1の免疫原である高分化型子宮体癌由来培養細胞株SNG-IIに投与し,コロニー形成法により殺細胞効果を判定した結果,PLA_2単独のIC_<50>は1.64×10^<-8>M,MSN-1-PLA_2複合体のIC_<50>は6.08×10^<-10>M(PLA_2濃度換算)であった。コントロールに用いた,MSN-1に対する認識抗原を有さない子宮頸部扁平上皮癌由来培養細胞株SKG-IIIaに対するPLA_2単独のIC_<50>は3.50×10^<-8>M,MSN-1-PLA_2複合体は10^<-6>Mでも殺細胞効果を認めなかった。以上より,MSN-1-PLA_2複合体はPLA_2単独投与と比べ約30倍の高い選択的殺細胞効果を示した。(3)in vivoにおける殺細胞効果の検討:SNG-II,SKG-IIIaを同一ヌードマウスの左右背部にそれぞれ移植し,腫瘍形成確認後,MSN-1-ADM複合体,MSN-1-gelonin複合体,MSN-1-PLA_2複合体の各々につき,静注群,腫瘍局注群を設け,相対腫瘍重量比を比較して殺細胞効果を検討した。その結果,何れの複合体においてもSNG-IIのみに対し腫瘍局注群,静注群の順に選択的腫瘍抑制効果が認められた。特にMSN-1-gelonin複合体において腫瘍局注群では明らかな選択的腫瘍縮小効果を認めた。以上よりモノクローナル抗体MSN-1を用いたミサイル療法の臨床治療応用の可能性が示唆された。

(1)免疫複合体の作製:当研究室で作製した,子宮体癌細胞上に出現する糖鎖抗原を特異的に認識するモノクローナル抗体MSN-1(IgM)と,抗癌剤アドリアマイシン(ADM),植物毒gelonin,及びコブラ毒phospholipase A_2(PLA_2)を,SPDPと2-iminothiolaneを用いてS-S結合させ,それぞれMSN-1-ADM複合体,MSN-1-gelonin複合体,MSN-1-PLA_2複合体を作製し,ゲル濾過法,陽イオン交換クロマトグラフィー法により分離精製した。電気泳動法,densitometryによりMSN-1 1分子当たり,それぞれADMが平均47分子,geloninが平均13.8分子,PLA_2が平均11.8分子結合した事が判明した。(2)in vitroにおける殺細胞効果の検討:MSN-1-PLA_2複合体をMSN-1の免疫原である高分化型子宮体癌由来培養細胞株SNG-IIに投与し,コロニー形成法により殺細胞効果を判定した結果,PLA_2単独のIC_<50>は1.64×10^<-8>M,MSN-1-PLA_2複合体のIC_<50>は6.08×10^<-10>M(PLA_2濃度換算)であった。コントロールに用いた,MSN-1に対する認識抗原を有さない子宮頸部扁平上皮癌由来培養細胞株SKG-IIIaに対するPLA_2単独のIC_<50>は3.50×10^<-8>M,MSN-1-PLA_2複合体は10^<-6>Mでも殺細胞効果を認めなかった。以上より,MSN-1-PLA_2複合体はPLA_2単独投与と比べ約30倍の高い選択的殺細胞効果を示した。(3)in vivoにおける殺細胞効果の検討:SNG-II,SKG-IIIaを同一ヌードマウスの左右背部にそれぞれ移植し,腫瘍形成確認後,MSN-1-ADM複合体,MSN-1-gelonin複合体,MSN-1-PLA_2複合体の各々につき,静注群,腫瘍局注群を設け,相対腫瘍重量比を比較して殺細胞効果を検討した。その結果,何れの複合体においてもSNG-IIのみに対し腫瘍局注群,静注群の順に選択的腫瘍抑制効果が認められた。特にMSN-1-gelonin複合体において腫瘍局注群では明らかな選択的腫瘍縮小効果を認めた。以上よりモノクローナル抗体MSN-1を用いたミサイル療法の臨床治療応用の可能性が示唆された。