破骨細胞への分化能を有するHL-60細胞の分子薬理学的研究

具有破骨细胞分化能力的HL-60细胞的分子药理学研究

基本信息

  • 批准号:
    07407078
  • 负责人:
  • 金额:
    --
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for General Scientific Research (A)
  • 财政年份:
    1995
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1995 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

HL-60細胞を1,25(OH)2D3(120nM),retinoic acid(RA: 10nM),IFN-γ(1000U/ml)およびTPA(100nM)存在下で3日間培養した。貧食能、非特異的エステラーゼ、NBT還元能および細胞の付着性の観察に基づき、HL-60細胞が1,25(OH)2D3およびIFN-γ処理により単球に、TPA処理によりマクロファージに、RA処理により顆粒球に分化していることを確認した。本実験では、これら分化したHL-60細胞における、破骨細胞の表現形質関連遺伝子の発現動態をRT-PCR法にて評価した。In situ hybridizationによりマウス骨髄細胞由来の破骨細胞様細胞に確認されたGTP-シクロヒドロラーゼ(CH)のmRNAは、未分化HL-60細胞およびRA処理細胞には発現していなかったが、1,25(OH)2D3およびIFN-γ処理細胞に明らかな発現が、TPA処理細胞には僅かな発現が認められた。単球、マクロファージ系細胞の増殖/分化を促進するマクロファージコロニー刺激因子(M-CSF)の受容体は、TPAおよび1,25(OH)2D3処理細胞において著しい発現を示したが、IFN-γおよびRA処理はこの発現を示さなかった。破骨細胞の機能に重要な役割を果たす酵素Carbonic anhydrase IIの発現は、RAおよびTPA処理細胞には認められず、1,25(OH)2D3およびIFN-γ処理細胞に発現した。接着因子オステオポンチンは1,25(OH)2D3およびRA処理細胞において強く発現したが、IFN-γおよびTPA処理細胞における発現は弱かった。一方、インテグリンの受容体であるαvβ2インテグリンは1,25(OH)2D3およびTPAにより遺伝子発現を示したが、IFN-γおよびPA処理細胞においてαvβ2インテグリンの発現は認められなかった。現在、破骨細胞はGM-CFUから枝分れして分化形成されていると考えられている。本実験でHL-60細胞の単球/マクロファージ系細胞への分化過程において、1,25(OH)2D3、IFN-γおよびTPA等の誘導剤により破骨細胞の表現形質関連遺伝子の発現に著しい相違が認められた。このうち1,25(OH)2D3は本研究に用いた破骨細胞関連遺伝子の全てを発現する細胞へ分化させていることを認めた。
HL-60 cells were cultured for 3 days in the presence of 1,25(OH) 2D3 (120nM),retinoic acid(RA: 10nM),IFN-γ(1000U/ml) and TPA(100nM). The results showed that there was no significant difference in the differentiation of granulocytes between HL-60 cells and HL-60 cells treated with IFN-γ, TPA and RA, and that there was no significant difference in the differentiation of granulocytes between HL-60 cells and HL-60 cells treated with IFN-γ. In this paper, the differentiation of HL-60 cells and the development of osteoclast expression related genes were evaluated by RT-PCR. In situ hybridization, GTP-1 (CH) mRNA was identified in osteoclast derived cells, in undifferentiated HL-60 cells and in RA-treated cells, and in 1,25(OH) 2D3-and IFN-γ-treated cells, and in TPA-treated cells. The receptor of M-CSF, TPA and 1,25(OH) 2-D3-treated cells, IFN-γ-treated cells and RA-treated cells were shown to promote proliferation/differentiation of human lung cancer cells. Expression of Carbonic anhydrase II, an enzyme important for osteoclast function, in RA-and TPA-treated cells, in 1,25(OH) 2D3-and IFN-γ-treated cells. Then the expression of IFN-γ and TPA in RA-treated cells was stronger and weaker than that in 1,25(OH) 2D3-treated cells. The expression of α v β 2 in the receptor of IFN-γ and PA-treated cells was detected by 1,25(OH) 2D3 and TPA. Now, osteoclasts are differentiated into GM-CFU. In this paper, we have identified the role of induction agents such as 1,25(OH) 2D3, IFN-γ and TPA in the differentiation of HL-60 cells, which are involved in the development of phenotypic genes related to osteoclasts. This study was conducted to identify osteoclast-related genes that were used in the development of cellular differentiation.

项目成果

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专利数量(0)
Togari, A. et al: "Gene expression of GTP cyclohydrolase I in the human promyelocytic leukemia cell line (HL-60) differentiated into monocytes and macrophages." The Japanese Journal of Pharmacology.67(Supp I). 24OP (1995)
Togari, A. 等人:“分化为单核细胞和巨噬细胞的人早幼粒细胞白血病细胞系 (HL-60) 中 GTP 环化水解酶 I 的基因表达。”
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