微量血液で肝病態を正確迅速に把握するための新たな血中ケトン体比測定システムの開発

开发新型血酮体比率测量系统，利用微量血液准确快速地了解肝脏病理

• 批准号: 07557083
• 负责人: 小澤 和惠
• 金额: $ 4.29万
• 依托单位: Shiga University of Medical Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research (B)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07557083/
• 关键词: アセト酢酸; β‐ヒドロキシ酪酸; 動脈血中ケトン体比(AKBR); NADHオキシダーゼ; 毛細管血中ケトン体比

急変する病態に対応して,AKBR(動脈血中ケトン体比)情報を適時に供給できるようにするため、NADHオキシダーゼを用いる高感度で迅速に血中ケトン体を分別定量できる新規な方法を確立した。すなわち、β‐ヒドロキシ酪酸脱水素酵素(β‐HBDH)反応でβ‐ヒドロキシ酪酸(β‐HBA)濃度に比例して増加するNADHにNADHオキシダーゼを作用させて過酸化水素を生成させ、同時にPeroxidase共存下で、3‐metyl‐2‐benzothiazolinone‐hydrazone‐6‐sulfateとN‐Ethyl‐N‐sulfopropyl‐3,5‐dimethylaniline,sodium saltを酸化縮合発色させ、その発色増加量よりβ‐HBAを求め、またアセト酢酸はβ‐HBDH酵素反応でβ‐HBAに変換し、血中の既存のβ‐HBAとの総和として測定した後、既存のβ‐HBA分を差し引いて求める方法を確立した。そしてこの方法の自動分析装置へ適用と接続したパソコンによる各ケトン体濃度とAKBR値を求めるデータ処理システムを完成させた。この方法は従来法がケトン体量をNADH自体の波長340nmでの吸光度変化から求めているのに対し、NADHオキシダーゼを利用してNADHの変化を波長570nmに極大吸収をもつ高感度な発色生成物(分子吸光係数:約50,000…NADHの約8倍以上)に導いて増幅し、その変化に替えて求める革新的なものである本測定システムよれば、(1)従来法で必要であった除蛋白操作を省略でき、血漿、血清検体を直接の試料とすることができた。(2)検体量を約1/30(30μl)に削減できた。(3)低濃度域のケトン体(総ケトン体としては0〜400μmol/l)を反応時間約12分で、正確に検出し、動脈血中ケトン体比(AKBR)を迅速に求めることができた。さらに本測定システムを用い、動脈血に近い毛細管血でのケトン体比と(AKBR)との相関関係を調べ、両者には強い相関があり、毛細管血でのケトン体比がAKBRの代用に十分なり得る知見を得た。

If you are in a state of illness, the AKBR (body ratio in the blood) should be supplied to the mice during the emergency, and the NADH should be rapidly determined by the method of quantitative determination of the new rules and regulations. Butyric acid dehydrase (β-HBDH) reverses the concentration of β-butyric acid (β-HBA). The proportion of β-HBA increases the effect of NADH on the formation of acidified water in the presence of maleic acid, simultaneous Peroxidase, and 3-metyl-2-benzothiazolinone-hydrazone-6-sulfate in the presence of isochronous Peroxidase. After sodium salt acidification, β-HBA, β-HBA and β-HBA in blood. The automatic analysis device uses the automatic analysis device to complete the test by using the AKBR system to determine the accuracy of the system. The method was used to determine the volume of NADH, the absorbance of autologous wavelength 340nm, the absorption spectrum of NADH, the absorption of 570nm and the sensitivity of color products (molecular absorbance: about 50000). (NADH is more than 8 times more than 8 times). This method is necessary to remove protein from the body, blood and serum samples. (2) the mass is about 1pm 30 (30 μ l). (3) in the low temperature range, the peak temperature is 0 ~ 400 umol

项目成果

M.Ichimiya: "Insulin and glucagon levels in living related liver transplantation: their interaction with the recovery of graft liver function." Transpl. Int.8. 165-168 (1995)

M.Ichimiya：“活体相关肝移植中的胰岛素和胰高血糖素水平：它们与移植肝功能恢复的相互作用。”

H.Sakumoto: "Ketone body ratios of capillary blood compared with that of arterial blood." Clinical Chemistry. (in press).

H.Sakumoto：“毛细血管血与动脉血的酮体比率。”

Y.Shimahara: "Surgical Nutrition: Strategies in critically ill patients" Springer‐Verlag, New York, 23 (1995)

Y. Shimahara：“外科营养：重症患者的策略” Springer-Verlag，纽约，23 (1995)

Y.terada: "ketone body ratio of the superior and inferior vena cava and pulmonary arterial blood in comparison with arterial blood." Clinical Chemistry. (in press).

Y.terada：“上、下腔静脉和肺动脉血与动脉血的酮体比率。”

K.Ozawa: "The redox theory in evolution" J. Hep. Bil. Pancr. Surg.2. 205-214 (1995)

K.Ozawa：“进化中的氧化还原理论”J. Hep。