角膜上皮創傷治癒に対するEGF,TGF-βの作用機序についての分子生物学研究

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1.角膜上皮細胞のintegrin β1 のmRNA発現に対するEGFの影響を知るために,10ng/mlのEGFを添加培養し,角膜上皮細胞のintegrin β1 のmRNA発現量の変化を経時的に検討した。integrin β1 のmRNA発現量はEGFの添加2時間後に添加前と比較して約2倍に増加し,その後徐々に減少した。2.種々の濃度のEGFを添加して2時間培養した時の角膜上皮細胞におけるintegrin β1 のmRNA発現量を検討した。integrin β1 のmRNA発現量は、培養中に添加したEGFの濃度に依存して増加した。これらのこのことから,EGFは角膜上皮細胞のintegrin β1の発現を促進することが明らかとなった。3.角膜上皮細胞のintegrin β1 のmRNA発現に対するTGF-βの影響を知るために,10ng/mlのTGF-βを添加培養し,角膜上皮細胞のintegrin β1 のmRNA発現量を経時的に検討した。いずれの培養時間においても,integrin β1 のmRNA発現量はTGF-β添加前のmRNA発現量と比べて,ほとんど変化を認めなかった。また種々の濃度のTGF-βを添加して培養した時の角膜上皮細胞におけるintegrin β1 のmRNA発現量は,TGF-βを添加してもほとんど変化を認めなかった。4.さらに角膜上皮細胞のintegrin β1 のmRNA発現に対するEGF,TGF-βの相互作用を知るために,EGF,TGF-β単独あるいは同時に添加して2時間培養した時の角膜上皮細胞におけるintegrin β1 のmRNA発現量の変化を検討した。EGFの添加によってintegrin β1 のmRNA発現量が約2倍に増加し,一方TGF-βをEGFと同時に添加培養するとintegrin β1 のmRNA発現量は変化しなかった。またTGF-β単独ではintegrin β1 のmRNA発現には変化を与えなかった。これらのことから,EGFが角膜上皮細胞のintegrin,β1 のmRNA発現を促進し,TGF-βがEGFのintegrin β1 mRNA発現の促進効果を抑制することが明らかとなった。