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CDDP耐性細胞の細胞膜メチオニン能動輸送に及ぼすcDDPの影響-cDDPの細胞内分布と葉酸代謝修飾の定量的評価-

cDDP对CDDP抗性细胞中蛋氨酸细胞膜主动转运的影响 - cDDP细胞内分布和叶酸代谢修饰的定量评估 -

基本信息

批准号：
07671295
负责人：
大村健二
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至 1997
项目状态：
已结题

项目摘要

ヒト胃癌由来のMKN-28、MKN-45と大腸癌由来のSW-48、HCT-15を用いて実験を行つた。各細胞を、プレートに付着した状態と培養液中に浮遊した状態でcDDP(5μM、10μM)に接触させた。接触時間は12ないし24時間とした。その後、Metの細胞内へのuptake'を^<14>C-Metを用いて測定した。細胞がプレートに付着した状態では、cDDPの濃度や接触時間に関わらず、MetのuptakeはMKN-45において最も抑制されていた。特に24時間接触の後は、72%のMetのuptake阻害が観察された。また、24時間接触後はSW-48においても54%のMetのuptake阻害が観察された。しかし、これらの結果からcDDPによる細胞膜中性アミノ酸transporter阻害作用は、従来の定説より遥かに軽微であるものと思われた。さらに、^3H-dThdのuptakeを同様に測定した。なお、^<14>C-Metと^3H-dThdのuptakeは生細胞数にて補正した。dThdのuptakeをみると、12時間接触、24時間接触ともにMKN-45で最も抑制されていたが、Metのuptake阻害と比較するとその阻害率は低率であった(22.2%vs45.4%、39,8% vs 71.6%)。細胞が培養液中に浮遊した状態では、いずれの細胞においてもcDDPによるMetのuptake阻害は認められなかった。以上より、(1)cDDPによるMetの細胞内取込み阻害作用は、多種の細胞において認められるものではなく、またその程度も軽微であるものと思われた。(2)特定の細胞(MKNー45)では、dThdのuptakeによって補正した後も明らかなcDDPによるMetのuptake阻害が認められた。(3)cDDPによるMetのuptake阻害は、いずれの細胞においても接着状態でのみ認められた。

MKN-28, MKN-45 and SW-48, HCT-15 are used to detect the origin of gastric cancer. Each cell was exposed to cDDP(5μM, 10μM) in the suspended state and suspended state in the culture medium. Contact time is 12 minutes and 24 minutes. The uptake of Met in cells was determined by <14>C-Met assay. The cells were exposed to high concentrations of cDDP and MKN-45, and the cells were exposed to high concentrations of cDDP and MKN-45. Especially after 24 hours of exposure, 72% of Met's uptake was detected. After 24 hours of contact with SW-48, 54% of Met's uptake resistance was detected. The result is that the cell membrane neutralizes the acid transporter, and the cell membrane neutralizes the acid transporter. 3 H-d Thd and uptake are measured simultaneously. C-Met <14>^3 H-d Thd and uptake the number of cells. MKN-45 was the most resistant to the uptake of dThd, 12-time exposure, and 24-time exposure (22.2% vs. 45.4%, 39.8% vs. 71.6%). The cells in the culture medium are suspended in the medium and the cells in the medium are suspended in the medium. The above mentioned cDDP can inhibit the growth and development of cells. (2)Specific cells (MKN-45) are identified by uptake of dThd. (3)cDDP, Met, Uptake, Cell, Cell.