新生仔ラットの脳内エストロゲン受容体アイソフォームの生理的機能の解析

新生大鼠脑内雌激素受体亚型的生理功能分析

• 批准号: 07740640
• 负责人: 折笠 千登世
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Nippon Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07740640/
• 关键词: エストロゲン受容体; アイソフォーム; 変異型遺伝子発現; 新生仔ラット

本研究では、脳内のエストロゲン受容体タンパク(ER)にいくつかの変異型が存在し、かつその機能が異なる可能性があるので、解析を行った。当該研究者は、これまで、発生成長に伴う正常型ERの発現調節の機構に注目し検討し、ERタンパクの出現の程度が雌雄で異なり、雄での発現は雌に比べて有意に低値を示すことを観察した。一方、ER mRNAの発現については、ERタンパクが減少するにもかかわらずER mRNAの発現は低下しない脳内領域が存在する事実を見出した。この現象は脳内領域における変異型遺伝子の発現の差に起因する可能性が考えられたので、変異型ERの解析を行った。その結果、ERの変異型であるDelta4(ER-D4)が新生仔ラットの脳に発現している事実を見出した。本年度は、これらの観察に基づいて解析を進め、次の結果を得た。(1)ER-D4の発現は、正常型の発現と比べると少なく、1/10程度であった。RNase protection assayによる定量解析の結果、雌雄間及び脳の領域間での発現の量はほぼ等しかった。これらの事実から、ERタンパクが減少しているにもかかわらずER mRNAの高い値が検出された現象はER-D4によるものではないことが示唆された。(2)次に、D4以外にER-D5及びER-D7の発現を新生仔ラット脳で検出した。これらの、変異型の発現量はER-D4と同様に低い値であった。(3)また、他の変異型ERの可能性を調べるために、PCR等の増幅条件を変え検索を進め、正常型の存在を示すバンドと、正常型よりも分子量の少ないバンドが検出された。PCR/Southern法により解析を進めた結果、低分子量のバンドは正常型と同様にER-cRNAプローブとhybridizeすることが明らかになった。現在、低分子量のERの塩基配列の検索を行い、新種のisoformであるか否かについて検討している。さらに、雌雄間及び脳の領域間で発現量の違いがあるかについて解析を進めている。以上の結果の一部は、第4回国際神経科学大会(IBRO, Kyoto,9-14,July,1995:Abstract, C2..41,pp240)で発表した。

In this study, the possibility of existence and function of different types of receptors (ER) was analyzed. When the researchers looked at the mechanisms regulating the development of normal ER, they found that the degree of ER development was male and female, and the male development was intentionally lower than the female development. On the one hand, the expression of ER mRNA has been reduced, and the expression of ER mRNA has been reduced. The possibility of the occurrence of this phenomenon in different fields is examined and analyzed. As a result, Delta4(ER-D4) was found to be the most common cause of death in newborn babies. This year's survey is based on the analysis of progress and results. (1)ER-D4 appears to be 1/10 of the normal type. The results of quantitative analysis of RNase protection assay, the amount of occurrence between male and female and between male and female fields, etc. The expression of ER mRNA was detected in the presence of ER-D4. (2)ER-D5 and ER-D7 were found in the second and third generation. The amount of light emitted by the light source is ER-D4 and the light source is low. (3)The possibility of different types of ER can be adjusted, the amplification conditions such as PCR can be improved, the existence of normal type can be indicated, and the molecular weight of normal type can be detected. PCR/Southern analysis results, low molecular weight and normal ER-cRNA hybridization Now, the low molecular weight of ER group alignment search, new species of isoform There is a difference between male and female, and between male and female, and between male and female. The 4th International Congress of Neuroscience (IBRO, Kyoto,9-14,July,1995:Abstract, C2. 41,pp. 240).

项目成果

Orikasa C., et al: "Expression of estrogen receptor in the facial nucleus is suppressed by estradiol, but not by testosterone, indicating a lack of requirement for aromatization" BRAIN RESEARCH. 693. 112-117 (1995)

Orikasa C. 等人：“面核中雌激素受体的表达受到雌二醇的抑制，但不受睾酮的抑制，表明缺乏芳香化的需要”BRAIN RESEARCH。