初代肝細胞三次元培養法の薬物代謝シミュレーターへの応用に関する研究

原代肝细胞三维培养方法在药物代谢模拟器中的应用研究

• 批准号: 07750886
• 负责人: 松下 琢
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07750886/
• 关键词: 初代肝細胞; ポリウレタンフォーム; 三次元培養; スフェロイド; 薬物代謝; リドカイン; アセトアミノフェン; 細胞毒性

1.ラット初代培養肝細胞を単層培養系とポリウレタンフォーム(PUF)三次元培養系で培養し、モデル薬物として局所麻酔剤リドカイン(脂溶性物質)と解熱鎮痛薬アセトアミノフェン(水溶性物質)を用いて、その薬物代謝能力について比較検討を行った結果、PUF三次元培養系では生体内と同様にリドカインの脱エチル化(第一相反応)・アセトアミノフェンの抱合化反応(第二相反応)が起こり、しかも従来の単層培養系よりも高い活性を長期間維持できることが示された。2.肝細胞に対する毒性作用を有する上記リドカインの投与濃度を変化させ、PUF三次元培養系と単層培養系で肝細胞の生存率の変化を調べた結果、単層培養系では比較的低濃度から生存率の低下が始まったのに対し、三次元培養系では生体内と同様な濃度で細胞毒性(生存率の低下)の発想が認められた。これらの結果から、肝細胞のPUF三次元培養系を用いることで薬物毒性試験を細胞レベルでシミュレートできる可能性が示唆された。3.レーザー出力制御機能を有する共焦点レーザー顕微鏡を用いて、三次元化した肝細胞集塊内部の生細胞の分布を調べた結果、三次元化していない肝細胞に比べて、三次元集塊化した方が生細胞の割合が多く維持されていることあが示された。このことがPUF三次元培養系で高い肝機能が維持される機能の一つと考えられる。

1. The primary culture of hepatocytes, the single-layer culture system, the three-dimensional culture system, the three-dimensional culture system, and the PUF system. All anesthesia and analgesic substances (fat-soluble substances) and antipyretic and analgesic substances (water-soluble substances) are used and their metabolism ability is the same. Comparing the results of 検椒行った, PUF three-dimensional culture system, PUF three-dimensional culture system, と同様にリドカインのDestigmatization (first reverse 鿜)・アセトアミノフThe ェンの cleavage reaction (second phase reaction) がriseこり and the しかも従のsingle-layer culture system よりも高いactivity を maintain the できることがshow された for a long time. 2. The toxic effects of hepatocytes are as follows: the dosage concentration of hepatocytes is adjusted, the survival rate of hepatocytes in PUF three-dimensional culture system and single-layer culture system are adjusted, and the results are simple The layered culture system has a low concentration and the survival rate is low, and the three-dimensional culture system has a low concentration in vivo and a cytotoxicity (low survival rate) in the three-dimensional culture system. The result of これらのから、The PUF three-dimensional culture system of liver cells is used いることで薬Toxicity test of cell-based toxicology test shows the possibility of toxicity test. 3. Use of confocal microscopy to control the function of the liver, and adjust the distribution of raw cells inside the hepatocyte agglomerates through three-dimensional transformation As a result, the three-dimensional agglomeration of hepatocytes is better than that of hepatocytes, and the three-dimensional agglomeration of hepatocytes and the cutting and maintenance of hepatocytes are as follows. The PUF three-dimensional culture system has high liver function and maintains liver function.

项目成果

K.Nakazawa: "Development of a liver function simulator using 3-dimensional culture of hepatocytes(I)" 化学工学会第27回秋季大会講演要旨集. 185- (1994)

K. Nakazawa：“使用肝细胞 3 维培养物开发肝功能模拟器（I）”化学工程师学会第 27 届秋季会议摘要 185-（1994 年）。

T.Matsushita: "Development of a hybird artificial liver support system using PUF/spheroid packed-bed" Animal Cell Technology. 7. 1049-1053 (1995)

T.Matsushita：“使用 PUF/球体填充床开发混合人工肝支持系统”动物细胞技术。

松下 琢: "肝不全ラット体外循環によるポリウレタンフォーム(PUF)/肝細胞スフェロイド充填層型人工肝臓の性能評価" 人工臓器. 24. 815-820 (1995)

Taku Matsushita：“使用体外循环对肝功能衰竭大鼠进行聚氨酯泡沫 (PUF)/肝细胞球填充人工肝脏的性能评估”Artificial Organs。

松下 琢: "ハイブリッド型人工肝蔵補助システム" 組織培養. 21. 473-476 (1995)

Taku Matsushita：“混合人工肝支持系统”组织培养。21. 473-476 (1995)。

中澤 浩二: "Development of drug metabolism simulator for alternatives to animal experimentation using 3-dimensional culture of hepatocytes" Proceedings of the 9th Annual Meeting of the Japanese. 9. 114-115 (1995)

Koji Nakazawa：“使用 3 维肝细胞培养替代动物实验的药物代谢模拟器的开发”第 9 届日本年会记录（1995 年）。