エビ類筋肉のアラニンラセマーゼの性質とその単離

虾肌丙氨酸消旋酶的性质及其分离

• 批准号: 07760208
• 负责人: 大熊 恵美子
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kyoritsu Women's University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07760208/
• 关键词: アラニンラセマーゼ; 甲殻類; D-アラニン

1.クルマエビ,ウシエビ,コウライエビ,ホッコクアカエビ,ミナミイセエビ,アメリカザリガニ,ズワイガニおよびモクズガニ筋肉のアラニンラセマーゼ(ARase)活性のpH依存性には種特異性は認められず,8.5付近に最適pHを示した。最大反応速度はウシエビおよびクルマエビ筋肉で特に高かった。アラニンに対する親和性は低く,ミカエリス定数はいずれも筋肉中のL-アラニン濃度よりもかなり高かった。また,他のアミノ酸には作用せず,アラニンにのみ特異的であった。2.海水順応させたアメリカザリガニでは,海水濃度の上昇と共にARase活性が高くなり,特に生理的pH付近の活性が上昇し,またミカエリス定数が低下し,作用しやすくなることが判明した。3.ウシエビ筋肉のARaseの精製により,単離にはいたらなかったものの,ARaseは最終的には約17,000倍に精製された.比活性はタンパク質1mg当たり567μmol/min,回収率は2.5%であった。分子量は約84,000と推定された。4.精製された酵素標品の最適pHは8.5で,生理的pH付近では最適pHの45〜75%であった。最適温度は35〜40℃で,40〜50℃で急激な活性低下が認められた。また,NaClおよびKClによる活性化は認められず,ピルビン酸およびL-アラニンにより強く阻害された。

1. pH dependence of ARase activity, species specificity, and optimum pH value of ARase activity, 8.5, near pH value. The maximum speed of reaction is high. The affinity of the protein is low, and the concentration of the protein is high. He is the only one who has the ability to react to the acid. 2. The increase of seawater concentration and the increase of ARase activity, especially the increase of physiological pH and the decrease of ARase activity, were identified. 3. The ARase is refined by about 17,000 times, and the ARase is refined by about 17,000 times. The specific activity was 567μmol/min at 1mg, and the recovery rate was 2.5%. The molecular weight is estimated to be about 84,000. 4. The optimum pH of the purified enzyme standard is 8.5, and the physiological pH is close to 45 ~ 75%. The optimum temperature is 35 ~ 40℃, 40 ~ 50℃, and the activity is low. In addition,NaCl and KCl can be used to inhibit the activation of the enzyme.