SV40温度感受性伊東細胞株の樹立およびコラーゲン産生の遺伝子調節

SV40温度敏感Ito细胞系的建立及胶原蛋白产生的基因调控

• 批准号: 07770365
• 负责人: 北村 幸郷
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770365/
• 关键词: 伊東細胞; simian virus 40; コラーゲン; 遺伝子治療

肝線維化をはじめとする組織の線維化の多くは不可逆的で、適切な治療法は確立されていない。申請者は培養伊東細胞を遺伝子の面から追究して、肝線維化を主体とする肝疾患に対し、その線維化の抑制による治療的意義ないしは効果を探る目的で研究を行った。マウス肝由来の伊東細胞にsimian virus 40温度感受性株の遺伝子を導入し、増殖能および伊東細胞固有の分化形質の発現が培養温度の変化により調節可能な伊東細胞株(SV40温度感受性伊東細胞株、A640-IS cell)を世界で初めて樹立した。A640-IS cellは33度の培養温度では大型T抗原が発現し、活発な増殖能を示したが、脂肪およびビタミンA摂取能ならびにデスミンの発現は軽度であった。培養温度39度の条件では、大型T抗原の発現は消失し、活発な増殖は停止したが、脂肪およびビタミンA摂取能ならびにデスミンの発現は増強した。この成果は現在投稿中である。また、線維芽細胞にIII型コラーゲンに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドをトランスフェクションし、遺伝子レベルでのIII型コラーゲンの産生抑制に成功した(Biochem.Biophys.Res.Commun.1995;215:849-854)。さらに、培養伊東細胞にIV型コラーゲンに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドをトランスフェクションし、遺伝子レベルでのIV型コラーゲンの産生抑制に成功した。以上の成果に加えて、各タイプのコラーゲンcDNAの5'末端と3'末端を逆向きに培養伊東細胞にトランスフェクションし、コラーゲン産生の抑制作用を認めている。

The liver line maintenance is irreversible and the appropriate treatment method is established. The applicant intends to conduct research on the effects of culturing Ito cells on the treatment of liver diseases and on the inhibition of liver fibrosis. Ito cell line (SV40 temperature-sensitive Ito cell line, A640-IS cell) was first established in the world. A640-IS cells were incubated at 33 ° C for the development of large T antigens, for the growth of viable cells, and for the development of fatty cells. Under the condition of incubation temperature of 39 ℃, the development of large T antigen disappeared, the growth of fat and protein increased. The results are now published in the journal. Successful suppression of the production of type III cytokinins in cell line and line germ cells (Biochem. Biophys.Res.Commun.1995;215:849-854). In addition, the production of type IV cytosine in cultured Ito cells was successfully inhibited by the control of cell cycle. The results showed that the 5'terminal and 3' terminal of the cDNA of each protein were inhibited by the reverse culture of Ito cells.

项目成果

Yukisato Kitamura: "Antisense Oligonucleotide Inhibits the Expression of Procollagen Type III Gene in Mouse Fibroblasts" Biochemical and Biophysical Research Communications. 215. 849-854 (1995)

Yukisato Kitamura：“反义寡核苷酸抑制小鼠成纤维细胞中 III 型原胶原基因的表达”生物化学和生物物理研究通讯。