大腸癌の5-フルオロウラシルに対する薬剤耐性機序の解明とその克服に関する研究

阐明结直肠癌对5-氟尿嘧啶耐药机制并克服其的研究

• 批准号: 07857040
• 负责人: 荻原 朝彦
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07857040/
• 关键词: colorectal neoplasms; fluorouracil; cultured tumor cells; anticancer drug sensitivity test

ヒト大腸癌細胞株4種類(C1,C1/FU,C4,H716)は,5%CO2の環境下で10%仔牛血清加RPMI-1640,2mMグルタミン添加にて培養した.各細胞株のdoubling timeは,25,26,24,28時間であった.薬剤感受性試験は,96穴マイクロプレートを使用し,MTTassayにて検討した.接触させる5-FUの濃度は,0.03μMから1mMまでの濃度範囲でhalf-log毎に10段階設定した.5-FU単独96時間接触時の各細胞株の5-FUに対するIC50は,C10.8,C1/FU 1.2,C40.7,H716 100μmであった.C1,C4は,5FUに対して感受性株であるものの,H716は,5FU自然耐性であった.感受性株であるC1に連続して5-FUを接触させて獲得耐性株C1/FUを作っていたが,前記のごとく耐性が弱くなり,親株とほぼ同等の感受性株に戻っていた.verapamil,dipyridamol,methotrexate,ara c, leucovorin, thymidine, IL-2, IFN-α, N-1379, etc,によるbiomodulationを検討した.dipyridamol, leucovorin, N-1379による5-FUの抗腫瘍効果の増強効果を認めた.また,thymidine添加においては5-FUの抗腫瘍効果を減弱した.Thymidylate synthaseのbinding assay, DNA,RNAへの5-FUの取り込みの測定,HPLCを用いた5-FUの細胞内代謝産物の測定、核酸合成酵素・代謝酵素の測定および葉酸プールの分析については,時間的制約の面から今年度の研究には間に合わなかった.次年度以降の検討事項としたい.

Colorectal cancer cell lines (C1,C1/FU,C4,H716) were cultured in the presence of 10% calf serum and RPMI-1640 at 5% CO2 and 2mM RPMI-1640. Doubling time,25,26,24,28 times. The sensitivity test is 96-point test,MTTassay test. 5-FU concentrations ranged from 0.03 μM to 1mM, and concentrations ranged from half-log to 10-step settings. 5-FU units were 96. IC50 for 5-FU at 100μm exposure. C1, C4,5-FU for susceptible strains, H716 for 5-FU natural tolerance. susceptible strain C1 was exposed to 5-FU, and the resistant strain C1/FU was obtained.Verapamil,dipyridamol, methorexate,ara c, leucovorin, thymidine, IL-2, IFN-α, N-1379, etc., were examined.dipyridamol, leucovorin, etc. N-1379 and 5-FU were used to enhance the anti-tumor effect. The anti-tumor effect of 5-FU was weakened by thymidine addition. The binding assay of Thymidylate synthase, the determination of DNA,RNA and 5-FU, the determination of intracellular metabolites of 5-FU, the determination of nucleic acid synthase and metabolic enzymes, and the analysis of folic acid by HPLC were studied in this year. In the following year, we will discuss the following matters: