妊婦末梢血中の胎児細胞検出に関する研究-非侵爵的出生前診断法の確立-

孕妇外周血胎儿细胞检测研究-无创产前诊断方法的建立-

• 批准号: 07857114
• 负责人: 福島 明宗
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07857114/
• 关键词: fetal cell; maternal blood; flow cytometry; Magnetic beads

1. FCM (flow cytometry)を用いた胎児由来細胞の精製:全細胞集団中におけるY chromosome陽性細胞の割合(陽性率)を計測してみたところ、FCM sorting前における陽性率は9%であったものが、抗ウサギヒト絨毛細胞膜モノクローナル抗体(TM)を用いた場合では48.5%と約5倍の増幅、Glycophorin A (GA)+CD71モノクローナル抗体(CD71)を用いた場合では37.5%と約4倍の増幅が可能であった。2. Magnetic beads (MB)を用いた胎児由来細胞の精製:(1) MB一段階による分離精製;TMを用いた場合では81.0%と約9倍の増幅が可能であったが、GAを用いた場合では26.0%で約2.9倍とこれはFCMを用いた場合よりやや成績の低下が認められた。このため我々は二段階分離精製法確立が必要と考え、以下の基礎実験をおこなった。(2) AIS+MB二段階分離精製法による細胞回収率の実験;まずCD45モノクローナル抗体陽性細胞をAISにて除去(CD45-)したところ、平均で88.2%の細胞が除去可能であった。さらにMBをもちいてGA陽性細胞の採取(GA+)を試みたところ、平均で3.93%の細胞を採取、すなわち平均で96.1%の必要ない細胞が除去可能であった。一方、MBのみを用いた二段階分離精製を行い、前者と比較してみたところ、第一段階除去過程(CD45-)では平均で77.3%の細胞が除去され、さらに(GA+)では平均で7.1%の細胞が採取、すなわち平均で92.9%の必要ない細胞が除去された。以上、精製率からみた場合の比較ではAIS+MBによる二段階精製法の方が有用であることが明らかとなった。今後の課題:2.の結論からみてAIS+MBによる二段階精製法が有用であると思われた。我々はさらにAIS+MB精製法による陽性率をFCMによる方法と比較検討するため、胎盤絨毛間腔血液を用いた実験を進めている所である。

1. FCM (flow cytometry) was used to detect the origin of fetal DNA: the whole cell set was cleaved with Y chromosome (sex rate), the sex rate of pre-FCM sorting was 9%, and the cell membrane antibody (TM) was about 5 times higher than that of the control. Glycophorin A (GA) + CD71 antiserum antibody (CD71) was used in combination with 37.5% and about 4 times as much as possible. 2. Magnetic beads (MB): (1) one segment of the MB was isolated from the cell: (1) the combination of TM was 81.0%, and that of TM was about 9 times. The combination of GA was 26.0%, and that of FCM was 2.9 times. Please tell me that the two-stage separation method makes sure that it is necessary to make sure that it is necessary to make sure that it is necessary. (2) AIS+MB two-stage isolation sperm method was used to determine the cell recovery rate, the cell recovery rate was significantly higher than that of the control group, and the cell recovery rate was significantly higher than that of the control group. (2) the AIS+MB two-stage isolation method showed that the cell recovery rate was significantly higher than that of the control group. (2) the AIS+MB two-stage isolation assay showed that the cell recovery rate was significantly higher than that of the control group. (2) the two-stage AIS+MB isolation assay showed that the cell recovery rate was significantly higher than that of the control group. MB