カルシトニン受容体異常についての分子生物学的研究

降钙素受体异常的分子生物学研究

• 批准号: 08670211
• 负责人: 久 智行
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Wakayama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08670211/
• 关键词: カルシトニン; Williams症候群; RT-PCRダイレクトシークエンス; 5′Rapid Amplification of cDNA Ends; fluorescent in situ hybridization

(1)Williams症候群患者血液に、SV40を感染させ、Williams症候群の細胞株を確立した。確立した細胞株をfluorescent in situ hybridazationで検討した所、染色体の異常が認められた。(2)Williams症候群患者血液中の白血球、及びその細胞株から、RNAを抽出し、カルシトニンのプライマーを用いて、RT-PCR-ダイレクトシークエンスを試みたが、欠損部が存在する為か、全塩基配列の確認には至らなかった。(3)そこで、ダイレクトシークエンスが可能であった部位の内、もっとも下流域に相当する部位から、5′Rapid Amplification of cDNA Endsを行い、cDNAクローンを得る事に成功した。(4)このクローンから、ダイレクトシークエンスを行った所、遺伝子バンクに存在しない塩基配列であった。(5)但し、RACE法は、PCR反応を基本とするので(PCR反応に付き物のア-ティファクトが起こり得るので)、念の為、現在、このクローンをサブクローニングし、塩基配列の同定中である。(6)さらに、cDNAライブラリーを作成する事で、配列を確定する予定である。

(1) The blood of patients with Williams syndrome is に, SV40を is infected with させ, and the Williams syndrome <s:1> cell line を is confirmed to be <s:1> た. Establish the た cell line をfluorescent in situ hybridazationで検 to investigate the <s:1> た and chromosomal chromosomal abnormalities が to identify められた. (2) patients with Williams syndrome の white blood cells in the blood, and び そ の cell lines か ら し, pump, RNA を カ ル シ ト ニ ン の プ ラ イ マ ー を with い て, rt-pcr ダ イ レ ク ト シ ー ク エ ン ス を try み た が exist, owe loss が す る か, salt base full column の confirm に は to ら な か っ た. (3) そ こ で, ダ イ レ ク ト シ ー ク エ ン ス が may で あ っ た parts within の, も っ と も basin under に quite す る parts か ら, 5 'Rapid Amplification of cDNA Ends を い, cDNA ク ロ ー ン を る matter に successful し た. (4) こ の ク ロ ー ン か ら, ダ イ レ ク ト シ ー ク エ ン ス を line っ た by, but 伝 バ ン ク に exist し な い salt base with column で あ っ た. (5) but し, RACE は, PCR 応 を basic と す る の で (PCR anti 応 に pay き content の ア - テ ィ フ ァ ク ト が up こ り have る の で), read の is, now, こ の ク ロ ー ン を サ ブ ク ロ ー ニ ン グ し, salt base with column の with fixed in で あ る. (6) さ ら に, cDNA ラ イ ブ ラ リ ー を made す で る, with columns を determine す る designated で あ る.

项目成果

Hisa T: "Butylated hydroxyanisole blocks the inhibitory effects of tumor necrosis factor-α on collagen productionon in human dermal fibroblasts." J Dermatol Sci. 12. 44-49 (1996)

Hisa T：“丁基羟基苯甲醚阻断肿瘤坏死因子-α 对人真皮成纤维细胞胶原蛋白产生的抑制作用。”J Dermatol Sci。12. 44-49 (1996)

Hisa T: "Establishment of human angiosarcoma cell line." B Cancer. 83. 589-591 (1996)

Hisa T：“人血管肉瘤细胞系的建立。”

Hisa T: "Allelic variants of calcitonin receptor in the Japanese population." Human Genet. 99. 38-41 (1997)

Hisa T：“日本人群中降钙素受体的等位基因变异。”

Hisa T: "Expression of antigens related to apoptosis and cell proliferation in chronic nonsuppurative destructive cholangitis in primary biliary cirrhosis." Virchow Arch. 429. 119-129 (1996)

Hisa T：“原发性胆汁性肝硬化慢性非化脓性破坏性胆管炎中与细胞凋亡和细胞增殖相关的抗原的表达。”

Hisa T: "Mobile fat ; 3 stages?" Australasian J Dermatol. 37. 223-224 (1996)

Hisa T：“移动脂肪；3 个阶段？”