滑膜炎症性マクロファージに多量に発現する分子のcDNAクローニング

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I C45抗原のcDNAクローニングmammalian発現ベクターpcDLSRαを使い、RA滑膜ライブラリーを作成した。B.Seedの方法にて、RA滑膜細胞を免疫して得られた5種の抗体を用いて、認識する抗原のcDNAクローニングをおこなった。C45抗原のcDNAクローニングにはまだ成功していないが、1種の抗体の認識する抗原は塩基配列の結果CD14であった。2 I8抗原のcDNAクローニングλgt11を用いてRA滑膜ライブラリーを作成し、I8抗体と反応する18個のクローンを得た。5種のクローンの部分的な塩基配列を検討したところ、1)カゼインキナーゼIIβ 2)チロシンフォスファターゼイプシロン 3)リボゾ-マルL23 4)遺伝子バンクに登録されているが機能が不明なもの 5)まだ遺伝子バンクに未登録のもの、であった。これらをプローベに他の13個のクローンとハイブリダイズさせたところ、1)とハイブリするものが他に1個みつかったが、他はハイブリしなかった。現在得られたクローンに共通なアミノ酸配列・構造はなく、I8抗体がどの構造を認識しているのか決定できていない。今後、他の発現系での抗体の反応性を検討する予定である。