ソフトレーザー照射に対する線維芽細胞の細胞外マトリックスmRNAの発現

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本研究においては、ソフトレーザーが組織あるいは細胞に直接的に作用しているかを解明するため、線維芽細胞の増殖・分化に重要な役割を果たす細胞外マトリックス(ECM)の発現状況を中心に、まず、線維芽細胞に対するレーザー照射の至適条件を増殖および形態的な面から検討した。次にムコ多糖類、プロテオグリカンなどのECMおよびコラーゲンの生合成について生化学的に測定を行った。さらECMのうち、線維芽細胞の増殖・分化に深く関与するfibronectinのmRNAの発現についてin situ hybridizationにより検索を行った。実験にはBALB/3T3-A31線維芽細胞、ソフトレーザーはSTOMALASER(Sedatelec社;He-Ne近赤外線レーザー、A〜Gの7種類のパルスモードがあり、細胞の種類により至適モードも異なる)を用いた。その結果、1)レーザーに対する線維芽細胞の感受性は47.5HzのAモードにおいて高く、照射時間、回数ではそれぞれ4分間、3回の条件において非照射control群に比べ、135%の増殖率を、さらにBrdUの取り込みについては、同条件下で150%と有意な値を示した。2)上記の照射条件における形態的な観察では、照射細胞においてはcontrolに比べ、ゴルジ空胞の増加およびその拡大が認められた。また、経時的に観察したところ、細胞分裂も促進することが明らかとなった。3)ECMはcontrolに比べ照射細胞では、初期にヒアルロン酸が、それに引き続きコンドロイチン硫酸Bの生合成が高まり、その結果コラーゲン合成も早期に起こることが明らかとなった。4)照射細胞におけるfibronectin-mRNAはゴルジ空胞の拡大およびその増加にともないsignalも増強されており、特にtypeIにおいてその傾向は顕著であり、typeII,IIIにおいてはわずかに認められる程度であった。今後は、fironectinのreceptorであるIntegrinについての検討の必要性があると考えられた。