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好中球のアポトーシスが口腔内生体防御機構に及ぼす影響について

中性粒细胞凋亡对口腔生物防御机制的影响

基本信息

批准号：
08672209
负责人：
沼部幸博
金额：
$ 1.15万
依托单位：
The Nippon Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至 1997
项目状态：
已结题

项目摘要

末梢血中の好中球と、歯肉固有層の毛細血管より遊走し、歯肉溝を経て口腔内に移行する唾液中の好中球を対象として、周囲の環境とアポトーシスの発現との関係を検索した。健常者の末梢血および唾液から好中球を分離し、PBS、唾液、PMA、腫瘍壊死因子(TNF-α)、Fas抗体(アポトーシス関連抗体)を好中球にそれぞれ加え,0時間から6時間インキュベートした。そしてその前後のFas抗原およびLewisY(Le^y)抗原の発現を、間接蛍光抗体法を用い、Flow Cytometryで検索した(平成8年度より継続)。さらに,各細胞群のアポトーシスの発現状態を透過型電子顕微鏡により形態学的に観察するとともに,各群の細胞よりDNAを抽出し,その断片化の状態をアガロースゲル電気泳動法により生化学的に検索した。そして以下の結果が得られた。1.フローサイトメトリーによる検索:(1)末梢血中の好中球では、唾液、TNF-α、Fas抗体の刺激により、Fas抗原およびLe^y抗原の発現が経時的に増加した。(2)唾液中の好中球では、Fas抗原の発現は末梢血よりわずかに増加し、Le^y抗原の発現は有意に高い値を示した。そしてこの傾向は、PBSおよび血清でのインキュベート後もほとんど変化しなかった。2.透過型電子顕微鏡による検索:(1)末梢血中の好中球では、唾液、TNF-α、Fas抗体による6時間の刺激で、アポトーシス細胞に類似した細胞が観察された。(2)唾液中の好中球にアポトーシス細胞の特徴を備えた細胞が多く観察された。3.アガロースゲル電気泳動法による検索:(1)末梢血中の好中球をTNF-αで3時間インキュベートすると,アポトーシス細胞の特徴であるDNAラダーが観察された。(2)唾液中の好中球にDNAラダーが観察された。以上のことより、好中球が末梢血より口腔内の唾液中に移行する過程で、唾液やサイトカインなどの影響を受け,壊死するのではなくアポトーシスを発現し,口腔内の恒常性の維持に関与している可能性が示唆された。

To explore the relationship between the development of peripheral blood and capillary migration in the oral cavity, and the development of peripheral blood and capillary migration in the oral cavity. Healthy people's peripheral blood and saliva are separated from each other, PBS, saliva, PMA, tumor necrosis factor (TNF-α), Fas antibody (antibody-related antibody) are added to each other, 0 time to 6 time. Fas antigen and Lewis Y (Le^y) antigen were detected before and after treatment, indirect fluorescent antibody method was used, and Flow Cytometry was used. In addition, the development status of each cell group was observed by morphological observation through electron microscopy, and the DNA of each cell group was extracted. The following results were obtained. 1. The detection of Fas antigen:(1) The stimulation of Fas antibody, saliva, TNF-α, Fas antigen and Le^y antigen in peripheral blood increased in time. (2)The expression of Fas antigen in saliva increased and the expression of Le^y antigen increased. The first time I saw him, I was in a bad mood. 2. Detection by transmission electron microscopy:(1) Detection of good globules in peripheral blood, saliva, TNF-α, Fas antibodies, 6-hour stimulation, and 6-hour detection of similar cells. (2)The characteristics of the cells in the saliva were observed. 3. Detection of TNF-α by electrokinetic method:(1) Detection of TNF-α in peripheral blood. (2)DNA in saliva was detected. The above results indicate that the migration of peripheral blood and saliva in the oral cavity is affected by the process of saliva transfer, and the occurrence of death is related to the maintenance of constancy in the oral cavity.