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白血球遊走と血管型カドヘリンの関係

白细胞迁移与血管钙粘蛋白的关系

基本信息

批准号：
10877037
负责人：
発地雅夫
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Shinshu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

血管内皮細胞のParacellular pathwayは白血球が血管外に遊出する際の主要経路である。Paracellularpathwayに位置するV-cadherinの白血球透過性に対する役割を検討した。V-cadherin全長のcDNAを導入した培養細胞(CHO/V-cad)とV-cadherinの細胞内ドメインを切断したcDNAを導入した培養細胞(CHO/V-cad△cp)のstableなCelllineを確立した。細胞染色でCHO/V-cad細胞はV-cadherin陽性、α-,β-cateninも陽性であるのに対して、CHO/V-cad△cp細胞はV-cadherin陽性だが、α-,β-cateninは陰性であった。2層式の培養プレートの上層にCHO/V-cadとCHO/V-cad△cpをそれぞれコンフルエントに培養し、白血球を上層に添加して下層には走化因子(ロイコトリエンや補体)を添加する。その結果、CHO/V-cad細胞、CHO/V-cad△cp細胞、CHO細胞を比較すると、CHO細胞が最も白血球をよく通し、次にCHO/V-cad△cp細胞、そしてCHO/V-cad細胞であった。今度は、同様に2層式の培養プレートの上層に上記3種の細胞をそれぞれコンフルエントに培養し,上層にV-cadherin抗体を追加することによる白血球の遊走能に対する影響を検討した。その結果、CHO細胞では影響はなく、CHO/V-cad細胞、CHO/V-cad△cp細胞ともに特異抗体を加えない時よりも、透過性が亢進しCHO細胞の透過性と近似していた。従って、V-cadherinは内皮細胞のParacellularpathwayを通る白血球透過性に深く関与しているものと考えられた。

The paracellular pathway of vascular endothelial cells is the main pathway for white blood cells to travel out of the blood vessels. Paracellular pathway location and V-cadherin leukocyte permeability are the same. The full-length V-cadherin cDNA has been introduced into cultured cells (CHO/V-cad) and V-cadherin has been cut into intracellular cDNA and introduced into cultured cells (CHO/V-cad△cp). Cell staining: CHO/V-cad cells are V-cadherin positive, α-,β-catenin is positive, and CHO/V-cad△cp cells are V-cadherin positive, and α-,β-catenin is negative. 2-layer cultured upper layer CHO/V-cad CHO/V-cad△cpをそれぞれコンフルThe cultured cells are cultured, and the upper layer of white blood cells is added, and the lower layer is added with the chemotherapeutic factor (ロイコトリエンや complement).その results, CHO/V-cad cells, CHO/V-cad△cp cells, CHO cells すると, CHO cells ををよく通し, subにCHO/V-cad△cp cells, CHO/V-cad cells であった. The upper layer of the upper layer of the 2-layer culture system and the 3 types of cell culture system. , the upper layer of the V-cadherin antibody is added, and the white blood cell migration can be affected.その results, CHO cells are affected by CHO cells, CHO/V-cad cells, CHO/V-cad△cp cells are specific antibodies, and permeability is increased. CHO cells are permeable and similar.従って、V-cadherinはEndothelial cellのParacellularpathwayを通るLeucocyte permeabilityに深く关与しているものと考えられた.