ラット前庭迷路における血液-内耳関門の発達

大鼠前庭迷路血-内耳屏障的发育

• 批准号: 11671672
• 负责人: 鈴木 光也
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11671672/
• 关键词: 血液―内耳関門; 前庭迷路; 発達; 透過型電子顕微鏡; Polythyleneimine; Vesicular transport; ラット

蝸牛および半規管膨大部の血液-内耳関門の発達を調べる目的で、内耳毛細血管の内皮細胞内のvesicular transportの変化を観察した。Vesicular transportの変化を形態学的に観察するため、陽性荷電物質であるpolyethyleneimineをトレーサーとして用いた。ネンブタール腹腔内投与による全身麻酔下に、生後1日目から3週間目のラットおよび成熟ラットの大腿静脈により0.1%polyethyleneimine(PEI)溶液を投与した。1時間大気中に放置した後、2%glutaraldehyde と1%phosphotangstic acid溶液にて還流固定を行った。蝸牛および半規管膨大部をエポン包埋した後、H800型透過型電子顕微鏡にて基底膜上のPEI粒子の分布を観察した。それぞれの未発達ラットと成熟ラットにおける毛細血管基底膜上のPEI粒子の分布は、血管条、ラセン靭帯、半規管膨大部において比較された。成熟ラットの毛細血管基底膜にはPEI粒子はほとんど認められなかった。このことは、成熟ラットの内耳毛細血管には選択的透過性が存在することを示唆している。未発達ラットにおける毛細血管基底膜のPEI粒子の分布は、血管条では生後 12-14日、ラセン靭帯では生後7-11日、半規管膨大部では生後4-7日で成熟ラットのレベルに達した。この結果より、ラットの血液―内耳関門は、少なくとも生後14日目までは完成しないこと、また蝸牛と前庭迷路の間で、血液―内耳関門の発達が異なることが示唆された。次の段階としては、感覚上皮下の基底膜上に存在するPEI粒子の変化についても観察する。

To investigate the development of vascular transport in endothelial cells of inner ear capillaries. The morphology of Vesicular transport is observed. The positively charged substance is polyethylene. Intraperitoneal administration of 0.1% polyethyleneimine (PEI) solution into the thigh vein from 1 day to 3 weeks after birth After 1 hour of incubation, 2% glutaraldehyde and 1% phosphotangstic acid solution were added to the solution. The distribution of PEI particles on the basement membrane was observed by H800 transmission electron microscope after embedding. The distribution of PEI particles on the capillary basement membrane was compared with that in the vascular strip, the ligament and the semicircular canal enlargement. Mature capillary basement membrane PEI particles The permeability of the capillaries of the inner ear in this way is shown in the middle of the brain. The distribution of PEI particles in the capillary basement membrane before development was 12-14 days after birth, the distribution of PEI particles in the vascular strip was 7-11 days after birth, and the distribution of PEI particles in the semicircular canal expansion was 4-7 days after birth. The result of this is that the blood-inner ear closes the door, and the eyes of the snails and vestibular labyrinth are completed on the 14th day after birth. The next step is to detect the presence of PEI particles on the basement membrane under the surface of the skin.