線虫C.エレガンスでの細胞内電位記録法の確立

线虫细胞内电位记录方法的建立

• 批准号: 11874124
• 负责人: 田辺 憲子
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Daiichi Hoiku Junior College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11874124/
• 关键词: C.エレガンス; 電気生理; タッチ感覚細胞; 機械受容; PLM; 線虫Cシー・エレガンス

線虫C.エレガンスではあまり電気生理学的な研究がなされていない。頭部全体から記録する咽頭全図やパッチクランプの実験が2.3あるのみである。そこで無傷の線虫での細胞内電位記録を試みた。線虫の体表近くには6個のタッチ感覚細胞が存在するが、その中の後半部のマイルドな触刺激に応じるPLM細胞からの膜電位記録を試みた。未開の分野なので実験をするにあたりいろいろと問題がでてきた。虫を動かないようにどのようにして固定するか?触刺激のしかたや触刺激を電位記録と同時にどのようにして記録するか等。固定に関しては外科用ボンドでうまくいった。デジタル信号とアナログ信号を同時に記録するには、AD変換器の未使用領域をうまく利用して、同時に記録できるようにAD変換器を改造した。タッチ感覚細胞からの細胞内記録の結果、静止膜電位は最大で-50から-60mVの電位が見られた。しかし普通は-20から-40mV位であった。マニピュレーターを操作して体の後半部をマイルドに刺激すると、刺激に呼応して10mV以上の刺激の間中続く大きな脱分極性の反応が記録できた。PLM細胞に電極を刺した状態で、前半部をタッチすると殆ど反応がないか、もしくは逆転したすなわち過分極のごく小さな反応が見られた。現在はタッチ刺激に反応できないmutantの線虫のタッチ感覚細胞にGFPを組み込み、mutantでの実験の準備をしているところである。

The な study of the electrical physiology of nematode C. Youdaoplaceholder0 スで スで あま <s:1> がなされて な な. Full head ラ ら record する full pharyngeal map やパッチ <s:1> ラ プ プ <s:1> experience が2.3ある みである みである. Youdaoplaceholder0 で intracellular potential recording of non-invasive nematode で <e:1> を try みた. Nematodes の surface nearly く に は six の タ ッ チ feeling が 覚 cells exist す る が, そ の の in the second half の マ イ ル ド な touch stimulation に 応 じ る PLM cells か ら の membrane potential records を try み た. The <s:1> division of fields な で で experiments をするにあた をするにあた ろ ろと ろと problems がでて た た. Insect を movement な ように ように <s:1> ように ように て て て fixation する する? Touch stimulation <s:1> <s:1> たや touch stimulation を potential recording と simultaneously に <s:1> ように ように て て recording する, etc. Fixation of に relations: て て for surgical use: ボ ドでうまく った った. デ ジ タ ル signal と ア ナ ロ グ を に records simultaneously す る に は, AD - changer の unused areas を う ま く using し て records, at the same time に で き る よ う に AD - changer を transformation し た. Youdaoplaceholder0 sensory 覚 cells ら ら the results of intracellular recording of <s:1> cells, the maximum resting membrane potential タッチ で-50 が ら-60 mv <s:1> potential が can be seen in られた. <s:1> ordinary ら -20 ら ら-40 mv であった. マ ニ ピ ュ レ ー タ ー を operation し て の second half body を マ イ ル ド に stimulus す る と, stimulating に shout 応 し て in above 10 mv の stimulation between の 続 く big き な points off の reverse polarity 応 が record で き た. PLM cells に electrode を thorn し で た state, the first を タ ッ チ す る と perilous ど anti 応 が な い か, も し く は inverse planning し た す な わ ち too extremely の ご く small さ な anti 応 が see ら れ た. Now は タ ッ チ stimulus に anti 応 で き な い mutant の nematodes の タ ッ チ feeling 覚 cells に GFP を group み 込 み, mutant で の be 験 の prepare を し て い る と こ ろ で あ る.

项目成果

田辺憲子: "線虫C.エレガンスのタッチ感覚細胞での細胞内記録の試み"生物物理. 40.suppl.. S209 (2000)

Noriko Tanabe：“尝试在线虫的触觉细胞中进行细胞内记录。”生物物理学40.suppl..S209（2000）。

N.Tanabe: "Sr^<2+> induce a release of divalent cation from internal Ca store by nerve stimulation at frog NMJ."Neuroscience Letters. 275. 163-166 (1999)

N.Tanabe：“Sr^2 通过青蛙 NMJ 的神经刺激，诱导内部 Ca 储存释放二价阳离子。”《神经科学快报》。