好熱菌酵素を利用したタンパク質の機能とダイナミクスの研究
利用嗜热酶研究蛋白质功能和动力学
基本信息
- 批准号:00J02059
- 负责人:
- 金额:$ 2.3万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
- 财政年份:2000
- 资助国家:日本
- 起止时间:2000 至 2002
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究では、前年度に引き続き、好熱菌Thermus thermophilus Cspホモログタンパク質の安定性及びダイナミクスの研究を行った。熱測定などを用いたTth Cspのダイナミクスの解析:高次構造を調べるため、同大学の曽田教授らとの共同研究で放射光施設SPring-8において、X線少角散乱実験を、また、東工大生命理学有坂助教授との共同研究で溶液沈降実験を行った。その結果、ある条件で二量体以上の会合構造をとることが示唆された。さらに、構造安定性を解析するため、高感度示差走査型熱量計(DSC)を用い、熱変性過程を測定した。その結果、pH4〜6において良好な変性曲線を得ることが出来た。さらに、高感度滴定型熱量計(ITC)を用い、DNAとの結合反応が解析をした。これらの結果などを基に、熱測定の手法に関するの論文を数報発表、また執筆中である。また、前年度までの結果と併せ、本タンパク質の諸性質に関する研究について、第16回Protein Society年会(San Diego, CA, USA)にて発表し、さらに、この諸性質をまとめた論文を投稿中である。C末端アミノ酸残基の役割:別種由来Cspの構造を基に、計算機シミュレーションを応用したホモロジーモデリングを行った。本タンパク質のC末側の5残基が全体の立体構造に影響を与えることが示唆された。さらに、本タンパク質は、常温菌相同タンパク質より熱安定性が高く室温における核酸との結合親和性が高かった。そこで、C末端残基を欠損させた変異体などを作成した。いくつかの変異体の核酸結合能を調べたところ、予想に反し、野生型と変化しないことがわかった。安定性への寄与について、研究指導者の城所俊一助教授らにより、研究が継続中である。以上、総括すると、会合しやすさなどの点で条件検討に苦労したが、本タンパク質がダイナミクス研究のよいモデルになることが示された。今後、本研究結果を基にして、さらに研究が発展するものと期待される。
In this study, in the previous year, Thermus thermophilus Csp bacteria were introduced, and good bacteria were found to be stable and stable. The Tth Csp instrument is used to analyze: the high-level construction of radiation equipment, the joint study of radiation construction SPring-8 equipment, X-ray, small-angle scattered radiation, and the study of solution sedimentation by Professor Yasuke Sakaka, a professor of physiology at the University of Technology. According to the results and conditions, the two-dimensional and above two-dimensional rendezvous will be used to indicate that they are instigated. The measurement of temperature, stability analysis, high sensitivity differential measurement (DSC) and sexual process measurement were used to determine the temperature. According to the results of the test, the pH4~6 test results show that the good sexual curve has a good result. High sensitivity titration meter (ITC) was used to analyze the concentration of DNA in combination with reverse chromatography. The results of the test show that the basic level, the test method, the number of documents, and the number of documents in the middle of the test are not available. The results of the previous year, the results of the previous year, the study of the 16th Annual meeting of the Protein Society (San Diego, CA, USA), the results of the previous year, the results of the previous year and the results of the previous year. C-terminal sulfonic acid residue operational cutting: for other reasons, Csp is used to create the base line, and the computer is used to determine the accuracy of the system. At the end of this article, all the students made a stereoscopic image and showed that they were instigated. The same temperature bacteria, the same temperature, the same temperature. The residues at the C-terminal and the C-terminal residues are not enough to form the whole body. The combination of nucleic acid and nucleic acid can make you want to react, wild type and wild type. The stability is sent to the doctor, the research refers to the assistant professor in the city, and the research is in the middle of the study. The above, including the above, the rendezvous, the conditions, the conditions and the conditions. In the future, the results of this study show that we are looking forward to the conclusion of this study.
项目成果
期刊论文数量(1)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
林-岩崎容子, 城所俊一: "ポストシークエンス タンパク質実験法 3 構造・機能解析の基礎 3・6 熱測定による解析 (分担)"東京化学同人. 175 (2002)
Yoko Hayashi-Iwasaki,Shunichi Shirodokoro:“后测序蛋白质实验方法3:结构和功能分析的基础3和6热测量分析(合著者)”东京化学同人175(2002)。
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岩崎 容子其他文献
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