細胞接着装置・細胞骨格と遺伝子発現調節をリンクさせる分子群の解析

连接细胞粘附设备/细胞骨架的分子分析和基因表达调控

• 批准号: 12026233
• 负责人: 柳澤 伸
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12026233/
• 关键词: Cortactin; ZO-1; Kelch; Drosophila; Xenopus; signal; scaffold; junction

本研究は細胞接着装置と細胞骨格をつなぐ足場分子として働いているZO-1を介した遺伝子発現調節経路を解明する研究の一部であり、ZO-1と結合するCortactinの機能の解明とCortactinに結合する因子の同定を目指した。Srcキナーゼの基質として同定されたCortactinは蛋白質間相互作用に関わる複数のドメインを含み、それ自身も足場蛋白質として機能している可能性が高い。まず、Cortactinの機能を生体内で実験的に解析する目的でXenopus Cortactin cDNAの単離を行った。その塩基配列は、ヒト、マウス、ラット、ニワトリなどと同様のドメイン配列から成ることを示した。F-Actinと相互作用するドメインの繰り返し数が異なるアイソフォームに対応するmRNAが存在し、ゲノムDNAの塩基配列との比較から、その生成はオルタナティブスプライシングによること示された。これについてマウス、ヒトでも同様の結果を得た。今後、Cortactinの機能解析にXenopusの初期胚を用いる予定である。次に、ツーハイブリッド法によりDrosophila Cortactinと相互作用する新規因子を探索した。得た遺伝子はDrosophila Kelchとの間に相同性のある産物をコードしていた(Kelch-2と呼ぶことにする)。Kelch-2はKelch同様に、N端側にBTBドメイン、C端側にKelchリピートを含んでいる。in vitroでの結合検定はCortactinのプロリンに富む領域とKelch-2のKelchリピートとの間での結合を示唆した。ノザン解析から、Kelch-2遺伝子はDrosophilaの発生を通じて発現していることが判った。今後、その分布パターンの観察などから機能の解析につなげたい。

In this study, we then set up a device to explain the pathways of ZO-1 by using cellular and cellular molecular markers to explain the pathways. in this study, we were able to explain the combination of Cortactin and Cortactin by using the combination of Cortactin and Cortactin. The interaction between Src and Cortactin proteins was determined by the same method. The number of complex proteins was detected by Elisa, and the possibility of protein binding was high. The purpose of this paper is to analyze the mechanism of Cortactin and Cortactin in vivo. The purpose of this paper is to separate the Xenopus Cortactin cDNA from the system. The base column, the column, the column, the The F-Actin interaction is different from each other. The number of data returned is different. The mRNA exists, the DNA is based on the column, the column is compared, and the data is generated. The results are the same as those of the same result. From now on, the Cortactin machine will be able to analyze the prediction of the embryo in the early stage of Xenopus. The second, the second, the third, the second, the second, the second You need to know that your child is Drosophila Kelch, and that you have the same identity. You need to know that you have something to do with it. (Kelch-2 calls you.) The Kelch-2 Kelch is the same, the N-terminal is the same as the BTB, and the C-terminal is the Kelch. The combination of the in vitro information system and the Cortactin information system indicates that in the rich field, the Kelch-2 economy, the Kelch economy, the financial crisis, the financial crisis and the financial crisis. Please analyze the information, Kelch-2 the Drosophila, and make sure that you will not be able to make a decision. In the future, the distribution system will be monitored and analyzed by the machine.

项目成果

Atsushi Yamashita et.al.: "Identification of Xenopus cortactin : two isoforms of the transcript and multiple forms of hte protein"ZOOLOGICAL SCIENCE. (in press).

Atsushi Yamashita 等人：“非洲爪蟾皮质蛋白的鉴定：转录物的两种亚型和 hte 蛋白的多种形式”动物学科学。

Takanori Katsube et.al.: "Genomic organization, transcription start sites, and chromosomal location of the Drosophila cortactin gene."Genes & Genetic Systems. (in press).

Takanori Katsube 等人：“果蝇 cortactin 基因的基因组组织、转录起始位点和染色体位置。”