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マイクロファブリケーションを用いた単一細胞実時間解析

使用微加工进行单细胞实时分析

基本信息

批准号：
12206028
负责人：
安田賢二
金额：
--
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

研究代表者(安田)はH11年度に(株)日立製作所より現職に転出して、新たに研究室を立ち上げ、H12年度「ゲノム生物学」の上記予算配分を利用することで、本提案にもある上記研究を開始した。本研究は以下に述べる3つのステージからなると考えている。すなわち、1)細胞を1細胞単位で隔離し連続培養観察できる装置系の開発、2)隔離した1細胞のDNA・mRNAを回収・分析して遺伝子多型解析・mRNA発現定量解析技術の開発、3)実際にモデル細胞(大腸菌を検討)を用いた細胞機能と遺伝子多型、mRNA発現量との関係の計測である。H12年度は、上記1)の「1細胞連続培養観察装置系」を開発した。装置は、スライドガラスに径30ミクロン程度の穴をマイクロ加工技術で掘り、この中に大腸菌を1匹閉じ込めた後、半透膜で上面をシール(ガラスと半透膜とはビオチン・アビジン結合で接着)したもので、さらにこの半透膜の上に培養液還流槽を設けることで、一定の培養溶液条件下での1細胞の活動を連続で顕微鏡観察できるものである。さらに光ピンセットと組み合わせることで特定の細胞を選択することも可能である。実際、本装置を用いることで、大腸菌1細胞の成長(伸長)速度、分裂周期を測定したり、細胞数を増やして相互衝突することが成長・細胞分裂にどのような影響をもたらすか、単離した1細胞が分裂してできた子細胞と親細胞との成長速度・分裂周期の違いなど従来の測定では計測できなかった1細胞の振る舞いを測定し、同一の遺伝子を持つ細胞相互の機能の違い等も測定できるようになった(論文2報投稿中)。

The representative of the research (Yasuda) Hitachi Institute of Science and Technology in H11, the laboratory of H12, the Journal of Biology in H12, and the beginning of the study in this proposal. In this study, the following statements are given in this study. For example, 1) 1-cell isolation link monitoring system is on, 2) isolation unit 1-cell DNA ·mRNA echo analysis mRNA quantitative analysis technology is available, 3) the international cell cell (large bacteria strain) can be used to detect sub-polymorphisms, and mRNA can be used to measure the number of polymorphisms. H12 year, last month 1) the "1 cell connection inspection device" is in operation. The equipment, equipment, etc. Under the condition of certain incubation solution, the activity of the cell, the link, the micrometer, the temperature, the temperature and the temperature. If you choose to select a specific cell, you may not be able to do so. In the world and in this device, the speed of cell growth (elongation), division cycle, cell number, cell division, cell growth, cell division, cell growth, cell division, cell division, cell division, Apart from the cell division, the cell growth rate, the cell growth rate, the cell growth