CD38欠損マウス外分泌腺細胞でのアゴニスト誘起性カルシウム応答の解析

CD38 缺陷小鼠外分泌腺细胞中激动剂诱导的钙反应分析

• 批准号: 12877006
• 负责人: 福士 靖江
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877006/
• 关键词: CD38ノックアウトマウス; capacitative Ca2+entry; submandibular acinar cell; acetylcholine; cyclic ADP-ribose; ryanodine; xestospongin C; IP3; サイクリックADPリボース; アセチルコリン; 膵腺腺房細胞; カルシウム オシレーション; リアノジン感受性プール; カルシウム シグナリング; ムスカリン受容体

外分泌腺細胞におけるcADPRの生理的重要性を見る事を主眼とし、平成13年度は顎下腺にてCa流入でのcADPRの役割を検討した。外分泌腺のCa流入は小胞体のCaが枯渇すると活性化される。CaプールはIP3とryanodine感受性の2種存在する。Ca流入における各プールの役割を見る為にCD38ノックアウトマウス(KO)を用いてACh刺激に応答するプールの分離・再構築を行った。細胞内のcADPRは存在しACh刺激で更に増加したが、KOでは検出されなかった。細胞内IP3量は刺激により増加し両タイプでの差はなかった。外液Caはそれらの産生に影響しなかった。パッチクランプ法によりCa machineryは両タイプに差がないことが分かった。外液無Ca下での正常のACh濃度-反応曲線は2相生で、低濃度側では緩やかで(第一相)100nMを境として急峻な勾配に変化した(第2相)。KOの第1相は正常と似ていたが第2相を欠いていた。これは第1相はIP3感受性プールからのCa放出、第2相ではryanodine感受性プールからの放出が加わる事を示唆する。外液Ca下で曲線は1相性になりKOも正常と一致した。外液Ni下では無Caの結果を再現した。外液無Ca下でACh高濃度刺激後KOは正常に比べ大きい流入を示し、再度刺激による反応は増加し正常と似たものになった。ryanodine処理細胞ではKOの結果を再現した。低濃度ACh刺激によるCa流入は両タイプに差はなかった。Xestospongin C処理ではAChの濃度に拘わらず流入は抑制された。以上の結果によりiCa流入はIP3感受性プールの枯渇に依存して増大するが、ryanodine感受性プールの枯渇が更に加わっても大きな影響はない。しかしryanodine感受性プールからのCa放出が阻害されるとCa流入は顕著な増加をする事が分かった。

The importance of cADPR physiology in exocrine glands, the importance of Ca in the subglands of Pingcheng in 13th year, the flow of Ca into the subglands of the exocrine glands, the flow of Ca into the lower glands. The exocrine gland "Ca" flows into the small cell body "Ca", "withered" and "active". There are two types of IP3 ryanodine receptivity in Ca. The flow of Ca into the local market is due to the use of CD38 stimuli (KO) in response to ACh stimulation and further separation. There are intracellular cADPR stimuli, ACh stimuli and KO stimuli. The amount of intracellular IP3 was increased by stimulation and the difference between the two groups was different. The external liquid Ca has a negative effect on the quality of the product. I don't know what to do. I don't know. I don't know what to do. I don't know. Under the external liquid Ca, normal ACh temperature-reverse curve 2 phase, low temperature temperature phase 1 (phase 1), 100nM condition, steep condition, phase 2 (phase 2). The first phase of KO is normal and the second phase is not good enough. Phase 1, IP3 receptivity, Ca release, phase 2, ryanodine receptivity, instigation. Under the external fluid Ca, the curve of 1 phase is normal and the KO is consistent. The results of Ca test in the external liquid Ni showed that the results showed no significant difference. After high intensity stimulation of ACh under external fluid Ca, KO "normal" was larger than "large" inflow, and re-stimulation was similar to "normal" and "normal". The results of ryanodine KO analysis show that the results are similar again. Low intensity ACh stimulates the inflow of Ca into mice. Xestospongin C restricts the flow of ACh to suppress the flow. The above results show that the flow of iCa into IP3 receptivity, sensitivity, dependence, ryanodine sensitivity, sensitivity, mortality, mortality, sensitivity, mortality, sensitivity, sensitivity The ryanodine sensitivity, the Ca release, the blocking, the Ca inflow, the increase in the number of things, the number of things.

项目成果

Yasue Fukushi: "Identification of Cyclic ADP-ribose-dependent Mechanisms in Pancreatic Muscarinic Ca2+ Signaling Using CD38 Knockout Mice"The Journal of Biological Chemistry. 276. 649-655 (2001)

Yasue Fukushi：“使用 CD38 敲除小鼠鉴定胰腺毒蕈碱 Ca2 信号传导中的环状 ADP 核糖依赖性机制”生物化学杂志。